SXI2a基因在新生和格特隐球菌交配型鉴定中的作用

吴劲松,冯晓博,卢月梅,吴伟元,李文青

新生和格特隐球菌是导致人类和动物发生致命感染的病原真菌。其中,新生隐球菌主要感染免疫抑制患者,而格特隐球菌可感染免疫正常人群。新生和格特隐球菌是一种担子菌酵母,在临床中多以酵母相存在。该菌具有异宗配合的有性生活周期,其交配体系存在 α和 a两种相对的交配型,即MATα和MATa。交配型α和 a发生交配后,将产生重组的担子孢子。研究发现,担子孢子比酵母细胞具有更强的感染能力〔1〕。与酵母形态的隐球菌相比,担子孢子被认为更可能是经呼吸道导致感染发生的起始致病因子〔2〕。因此,α和a交配型的准确鉴定及后续研究将有利于阐明新生和格特隐球菌的遗传学、生物学和致病性特征。

基因分型结果表明,根据一定的遗传差异,新生和格特隐球菌各分为VNI-VNIV和VGI-VGIV 8种主要基因型;不同的主要基因型具有不同的地理分布和致病特性〔3〕。目前,交配型的鉴定主要包括PCR特异扩增分型和交配试验〔4〕。由于在大部分研究中分离的a交配型菌株较少,使得设计一种可通用于快速鉴定所有主要基因型a交配型的PCR方法及评价现有的鉴定a交配型的方法在各主要基因型中的通用性均显得非常重要。本文通过设计针对a交配型位点内特有的SXI2a基因的特异扩增法,并和现有的针对STE20a、MFa或 ST E3a基因的特异扩增法及交配试验进行比较,评价其在鉴定新生和格特隐球菌各主要基因型 a交配型中的作用。

1 材料与方法

1.1 菌株……