布鲁菌病的实验室检测方法

辛梅平 林瑞生 王 君

山东省安丘市疾病预防控制中心（262100）

布鲁菌病的临床表现不具特异性，其诊断必须依靠常规的细菌培养和（或）血清学方法检测高水平的特异性抗体，但是有一定的局限性。国内外学者将聚合酶链反应（PCR）应用于布鲁菌病研究的许多领域。为此，笔者将以上常用布鲁菌病实验室检测方法进行总结，以指导疾病预防控制机构在人群中开展疾病筛查和临床诊断工作。

1 血液标本细菌培养法

1.1 双相培基培养法

在100mL三角烧瓶中盛20～30mL琼脂培养基，灭菌，制成斜面，然后无菌加入10mL5%的枸橼酸钠，1%葡萄糖糖和经113℃ 10min灭菌的1%甘油肉汤。无菌取血，加入双相培养基的肉汤中，轻轻混合后倾斜，使被检血液及肉汤很好地涂在琼脂斜面上，置37℃温箱中培养，3d后观察结果。如未发现布鲁菌生长，可再倾斜，继续培养观察，如有可疑菌生长，可转种纯培养，待进一步鉴定。在3～4周未见可疑菌生长，可停止培养，定为阴性。

1.2 感染未受精鸡蛋法

取2个新鲜鸡蛋，每个接种被检血液0.2mL。把鸡蛋放在固定架上，钝端朝上，蛋壳用乙醇和碘酒消毒，然后用眼科手术刀在钝端顶部中心穿1个小孔，用3cm长的注射器针头将被检血液注入卵黄中，立即用灭菌石蜡将孔密封，置37℃温箱中培养。5d后把接种鸡卵无菌打开，用无菌的毛细管把接种血液部分的卵黄及蛋清吸出0.3～0.5mL转种于培养基上，置37℃温箱中培养，2～3d观察1次，3～4周不见可疑菌生长可停止培养。

2 常用的血清凝集反应技术

2.1 平板凝集反应

该反应是一种操作简便、特异性强及敏感性高的诊断布鲁菌病的方法。……