HSP60通过Toll样受体对ApoE-/-小鼠树突状细胞功能影响研究①

吴 伟 蒋振忠 周 游 (南京医科大学第二附属医院心内科,南京 210011)

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)发生及发展为不稳定斑块均与免疫炎症反应有关[1],树突状细胞(Dendritic cell,DC)是体内专职的抗原呈递细胞,有大量证据显示DC参与AS的免疫炎症反应。近来研究表明,DC呈递的抗原有多种,如:oxLDL、C反应蛋白、LPS及热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)等[2]。而HSP是一种高度保守蛋白家族,目前以HSP60为心血管基础研究的热点。前期研究证实,HSP60可以在体外显著促进DC的成熟及活化,并且负载HSP60的DC可以显著促进AS的进展,并导致斑块的不稳定[3]。同时临床发现,冠心病患者体内存在DC介导的HSP60抗原特异性细胞毒T淋巴细胞[4]。然而HSP60激活树突状细胞机制及其抗原识别途径和调节Th1/Th2分化的机制还不清楚。

近年研究发现,DC表面表达一种能识别病原微生物上的高保守结构基序-病原相关分子模式(PAMP)(如HSP60)的受体-Toll样受体(Toll-like receptor,TLR),通过TLR,DC活化并启动获得性免疫反应,TLR是连接非特异免疫和特异免疫的桥梁[5]。在TLR家族中TLR4是最具有特征的,越来越多的证据显示TLR4在AS斑块进展中有重要作用,AS斑块局部存在TLR4的高度表达。免疫状态在分子水平是通过一系列完善的细胞间信号传导途径来实现紧密调控的[6],主要通过蛋白磷酸化来调节调控蛋白的激活与失活。目前已知促分裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一种高度保守的激酶家族,用以调节细胞外信号传导进细胞内部,其中p38和ERK被认为是最为重要成员[7]。DC的激活标志在于其表面共刺激分子CD80、CD86及分泌炎性因子 IL-6、TNF-α等上调,故推测HSP60可能通过与TLR4结合,介导MAPK信号转导激活DC,本研究通过在体外应用HSP60刺激动脉粥样硬化动物模型的DC,并检测DC的TLR4、p38和ERK及DC激活标记物水平以验证上述假设是否成立。……