光对胆红素稳定性的影响及其在桂蒲肾清片中的含量测定

张东方，周美环，袁长季

（1.中国医科大学药学院生药教研室，沈阳 110001；2.沈阳东北大药房连锁店，沈阳 110023）

在含人工牛黄、牛黄的制剂中，含量测定项常以胆红素为指标性成分。桂蒲肾清片由人工牛黄、蒲公英、三七、鸡内金和肉桂等12味中药组成，在桂蒲肾清片的含量测定中，发现胆红素对光稳定性较差，为此，考察了光照对胆红素稳定性的影响。同时，并对含量测定方法学进行了考察。

1 仪器、试药及溶液制备

1）仪器：Waters2695型高效液相色谱议；色谱柱：迪马Diamonsil（150 mm×4.6 mm）色谱柱。2）试药：胆红素为中国药品生物制品检定所提供，批号：100077-200503。3）试剂：甲醇、四氢呋喃为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂为分析纯。4）色谱条件：色谱柱：（1）十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（150 mm×4.6 mm）。（2）柱温25℃。（3）流动相：甲醇-四氢呋喃-0.5%醋酸溶液（80∶10∶10）；流速 1.0 mL/min；检测波长450 nm。5）对照品溶液的制备 精密称取胆红素对照品适量，置棕色量瓶中，加三氯甲烷制成每毫升含29.04 μg的溶液（避光），即得。6）供试品溶液的制备 取本品，研细，取约2 g，精密称定，精密加入三氯甲烷25 mL，称定质量，超声处理15 min，放冷，再称定质量，用三氯甲烷补足减失的质量，摇匀，滤过，取滤液（避光），即得。

2 实验方法

2.1 胆红素稳定性考察

2.1.1 稳定性实验 取供试品（批号050501），分别在 0、0.5、1、1.5、2、3、4 h 进样，结果见表 1 及图 1。结果表明，胆红素峰面积下降趋势非常明显，稳定性较差。

表1 稳定性实验结果Tab.1 Results of stability test for cholerythrin

2.1.2 胆红素的紫外光谱测试 取胆红素对照品溶液，分别在对照品溶液配制后（a）、避光放置3 h后（b）及在日光下放置3h后（c），测试紫外光谱，见图2。从光谱图可以看出，b与a略有变化，而c与a变化明显，最大吸收峰有明显紫移，紫外光谱图与胆红素光谱有明显差别。……