CD105在急性白血病中的表达及其临床意义

何建业 张秋堂

CD105是内皮细胞表面与增殖相关的膜抗原，同时又是调节转化生长因子-β (Transforming growth factor β，TGF-β)受体复合物成分之一，其主要作用为抑制TGF-β的生物学效应，促进血管新生，是新生血管的标志。然而，CD105在肿瘤细胞，如原发性或转移性黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、卵巢的子宫内膜样癌细胞上弱表达［1］。国外研究表明，CD105在部分急性白血病细胞高表达［1］，其临床意义需要进一步研究，国内未见报道。本文应用流式细胞术检测了急性白血病骨髓细胞中CD105的表达，并探讨了其临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料 初治和复发急性白血病患者61例，其中ALL18例，AML43例;患者平均年龄38岁(14～70岁)，男40例，女21例，初治患者52例，复发患者9例。均为郑州大学第一附属医院血液科2007年5月至2007年12月住院患者，经临床、血常规和骨髓细胞形态学与细胞化学染色，流式细胞学分型等检查后确诊，符合1991年FAB分型诊断标准［2］。浸润组定义为有淋巴结、肝脾肿大及齿龈肿胀的患者。对照组15例，男9例，女6例，年龄20～50岁(平均35岁)均为患非恶性血液疾病的住院患者，血常规及骨髓形态学正常，无肝、脾及淋巴结肿大。

诱导缓解治疗方案及疗效判断初治AML患者(除M3外)采用标准蒽环类药物联合阿糖胞苷(3+7)方案进行诱导化疗。M3患者主要采用全反式维甲酸或全反式维甲酸联合亚砷酸诱导治疗，直至完全缓解(CR)。ALL患者接受标准VDCP(长春新碱、柔红霉素、环磷酰胺、强的松或地塞米松)方案或VDCLP(VDCP+左旋门冬酰胺酶)作为诱导缓解治疗，1个疗程治疗结束3周后，根据血常规和骨髓细胞学检查，参照张之南主编的《血液病诊断及疗效标准》(第三版)［2］判断疗效。

1.2 实验材料 CD105鼠抗人CD105单克隆抗体为美国Lab Vision公司产品;流式细胞仪:FAC-Scan型，美国 BECTON DICKINSON(BD)公司。

1.3 实验方法 在无菌条件下按照常规操作穿刺，抽取骨髓1 ml，肝素抗凝，用0.01 mol/L，PBS1∶1 稀释，以淋巴细胞分离液(Ficol，l密度1.077)按常规方法分离骨髓单个核细胞，并调整细胞浓度为1×106/L。取2支试管，1管为参照管，加有IgG1;另1管为试验管，加有FITC结合的CD105单克隆抗体(为美国Lab Vision公司产品，1∶20稀释)，各取100μl细胞悬液加入2管，室温避光孵育30 min，PBS洗涤3次后用流式细胞仪检测骨髓细胞CD105的表达水平。流式结果判定:以Cell Quest软件获取分析数椐，定量分析每管样品中10000个细胞，检测细胞中CD105抗原的表达率。

1.4 统计学处理 应用SPSS 11.0统计软件进行数据处理，统计数据以样本均数±标准差(x±sD)表示，首先对资料进行正态及方差齐性检验。多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用独立样本t检验，以上均取α=0.05为显著性检验水准。

2 结果

2.1 CD105在急性白血病的表达 CD105在急性白血病的表达率［(30.39±8.69)%］明显高于在对照组表达率［(1.90±0.61)%］(P＜0.05)。ALL患者CD105阳性率为［(49.92±16.71)%］，AML 患者 CD105阳性率为［(22.21±9.95)%］，两者间差异有统计学意义(P＜0.05)，AML患者CD105表达率显著高于对照组(P＜0.05)。结果如图1示。

2.2 CD105在不同类型急性白血病的表达 CD105在急性白血病各亚型中的表达有差异(表1)，表达率最高的是B-ALL，其次是AML-M5。在AML-M3中，有2例复发患者CD105的表达率均＞40%，余样本表达率在(0～10)%。见表1。

表1 CD105在急性白血病各个类型中的表达

2.3 CD105与临床的关系 在10例AL患者中CD105化疗前表达率［(48.74±16.45)%］，缓解后表达率为［(3.99 ±1.45)%］，两者相比有统计学意义(P＜0.05);浸润组CD105表达率［(41.39±14.05)%］高于非浸润组表达率［(21.06±9.14)%］(P＜O.01);初治组［(30.92±9.92)%］和复发组［(24.17±10.06)%］的表达率显著高于对照组(P＜0.05)，缓解组表达率［(3.99±1.45)%］与对照组相比无统计学意义(P＞0.05)。进一步观察CD105水平与治疗反应，发现经过一疗程诱导治疗达完全缓解者 CD105表达率［(25.74±10.50)%］低于未达到缓解者表达率 ［(40.73±14.37)%］(P ＜0.05)。

图1 CD105在急性白血病细胞的表达

3 讨论

CD105为细胞膜糖蛋白，是TGF-β受体复合物的成分之一，能调节细胞对TGF-β的反应，是新生血管的标志。CD105能调节内皮-间质间的信号传递，参与血管新生过程，而血管新生是肿瘤普遍存在的特征，与肿瘤组织的浸润、转移密切相关。在不同组织来源的恶性肿瘤中，CD105在肿瘤组织及其周围的动脉、静脉的内皮细胞强表达［4］，并且CD105主要在未成熟的血管表达，少数情况下可在肿瘤细胞弱表达［5］，由于CD105在恶性肿瘤中的表达可以反应出肿瘤血管新生和内皮细胞活跃情况，所以CD105的高表达可作为恶性肿瘤患者转移和预后判断的指标之一。

近年来CD105在肿瘤细胞上的表达也做了大量的研究，其在急性B淋巴细胞白血病表达82%，在急性T淋巴细胞白血病表达7%。CD105在急性髓系白血病中表达47%，在急性髓系白血病亚型中表达阳性率M1为35%，M2为47%，M3为0%，M4为26%，M5为32%［1］。本文实验结果提示:CD105在B型急性淋巴白血病中表达率明显高于在急性髓系白血病表达率，且在急性T淋巴白血病中表达低，与上述报告一致。而CD105在急性髓系白血病各亚型中表达情况与文献对比各亚型表达率略有不同，可能与本研究各亚型收集样本量较小有关。

文献报道:CD105表达在前-B淋巴细胞白血病和髓系白血病细胞上，由于CD105在骨髓肿瘤细胞上的过表达抑制了TGF-β对骨髓的增殖抑制作用，因此CD105间接促进了骨髓的过度增殖，考虑这为CD105在急性白血病中发病机制［6］。本研究发现，急性白血病初治组CD105的表达水平显著高于对照组表达水平，缓解组表达比初治组显著降低，而复发患者表达再次升高，可能提示异常表达的CD105与急性白血病发病有关。本研究结果进一步表明，CD105在化疗前后表达水平有显著差异，且浸润组CD105表达率显著高于非浸润组的表达率，这表明CD105是白血病细胞生物学行为重要的影响因素。El-Gohary［7］等发现CD105与肿瘤的预后有关。本研究观察到CD105表达水平与治疗的反应有关，CD105表达水平高的缓解率低。提示CD105的表达可能与白血病预后有关。因此，CD105在急性白血病中的高表达可能与急性白血病的发生、发展和预后以及类型有关。

［1］Fonsatti E，Del Vecchio L，Altomonte M，et al.Endoglin:An accessory component of the TGF-beta-binding receptor-complex with diagnostic，prognostic，and bioimmunotherapeutic potential in human malignancies.J Cell Physiol，2001，188(1):1-7.

［2］张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准.科学出版社，2007:131-133.

［4］Li SL，Gao DL，Zhao ZH，et al.Correlation of matrix metalloproteinase suppressor genes RECK，VEGF，and CD105with angiogenesis and biological behavior in esophageal squamous cell carcinoma.World J Gastroenterol，2007，13(45):6076-6081.

［5］Yu D，Zhuang L，Sun X，et al.Particular distribution and expression pattern of endoglin(CD105)in the liver of patients with hepatocellular carcinoma.BMC Cancer，2007，7:122.

［6］Letamendia A，Lastres P，Almendro N，et al.Endoglin a component of the TGF-beta receptor system，is a differentiation marker of human choriocarcinoma cells.Int J Cancer，1998，76(4):541-546.

［7］El-Gohary YM，Silverman JF，Olson PR，et al.Endoglin(CD105)and vascular endothelial growth factor as prognostic markers in prostatic adenocarcinoma.Am J Clin Pathol，2007，127(4):572-579.