迟缓爱德华氏菌胶体金快速检测试纸的研制＊

辛志明

（1.福建省淡水水产研究所，福建福州350002；2.福建医科大学福建省新药安评中心，福建福州350108）

迟缓爱德华氏菌胶体金快速检测试纸的研制＊

辛志明1，2

（1.福建省淡水水产研究所，福建福州350002；2.福建医科大学福建省新药安评中心，福建福州350108）

本研究用纳米胶体金颗粒标记抗迟缓爱德华氏菌（AL60306NA1）单克隆抗体3A7并制备金标垫，将抗迟缓爱德华氏菌（AL60306NA1）单克隆抗体4F11与羊抗鼠抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜，建立迟缓爱德华氏菌的胶体金免疫层析快速检测方法。经过对试纸条的特异性和灵敏度测定，结果表明：试纸条与嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌、海安气单胞菌、产碱假单胞菌、无乳链球菌、大肠埃希杆菌、哈维氏弧菌、鳗弧菌、创伤弧菌、副溶血弧菌、类志贺邻单胞菌、鲁氏不动杆菌等15种水产常见病原菌没有交叉反应，与迟缓爱德华氏菌特异性反应，检测灵敏度为1×105cfu·mL－1，检测所需时间低于20 min。所制备的迟缓爱德华氏菌胶体金免疫层析检测试纸条具有快速、简便、特异性高和适应基层生产推广应用等优点。

迟缓爱德华氏菌；单克隆抗体；胶体金；免疫层析

迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）是牙鲆、大菱鲆、鳗鲡等多种水产养殖动物的致病菌［1－2］，导致了较严重的经济损失。迟缓爱德华氏菌的检测和鉴定方法主要有生理生化指标鉴定法［3］，分子生物学鉴定法［4－5］和间接EL1SA法［6］、荧光抗体技术［7］、斑点免疫金染色诊断方法（Dot—IGS）［8］等免疫学鉴定法。已建立的这些方法虽然各有优点，但均难以做到即时、快速、便捷，难以在基层养殖场推广使用，因而，建立迟缓爱德华氏菌灵敏度高、特异强、检测时间短、简易的诊断和检测技术对疾病的防控具有重要意义。……