我院临床分离的26株铜绿假单胞菌耐药性及其所产β-内酰胺酶的基因型分析Δ

王 杨，高 辉，黄云昆，付晓野，徐 敏（昆明市延安医院检验科，昆明市 650051）

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）广泛分布于自然界，属于条件致病菌，在正常人体内很少致病，却是医院感染的重要病原菌之一。随着新型广谱抗菌药物的广泛应用，PA对β-内酰胺类抗菌药物的耐药性日益严重，限制了抗菌药物的选择，给临床抗感染治疗带来了极大的困扰。本研究收集我院临床标本中分离的26株PA，通过研究其所产β-内酰胺酶的基因型及耐药性特点，为进一步研究昆明地区PA耐药基因的分布情况奠定基础，为减少耐药PA的产生、提高临床抗感染治疗效果提供科学依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

VITEK32型全自动细菌鉴定仪（法国生物梅里埃公司）；聚合酶链反应（PCR）仪（德国Biometra公司）；PowerPac Basic电泳仪和Laboratovies 6000凝胶成像系统（美国Bio-Rad公司）。

1.2 菌株

2009年6月－2009年12月我院检验科临床标本中分离的非重复性PA26株；质控菌：大肠埃希菌（ATCC25922）和铜绿假单胞菌（ATCC27853）均由云南省临检中心提供。

1.3 试药

药敏试验用M-H培养基和亚胺培南、环丙沙星药敏纸片均为英国Oxoid公司产品；哌拉西林、氨曲南、头孢他啶、头孢哌酮、头孢吡肟、替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、妥布霉素、复方磺胺甲唑（复方新诺明）、左旋氧氟沙星药敏纸片均为北京天坛药物生物技术开发公司产品；细菌基因组提取试剂盒（天根生化科技（北京）有限公司）；基因扩增试剂盒（Taq PCR MasterMix）（北京博迈德科技发展有限公司）；PCR扩增引物（北京百泰克生物技术有限公司合成）。……