低湿度培养诱生变形杆菌复杂群集运动增殖生长模式

刘艳霞，刘蕾，刘俊康，邓渝

(第三军医大学医学检验系生物波研究中心，重庆400038)

变形杆菌(Proteus mirabilis)被用作模拟微生物和其他复杂自身机化系统(self-organizing systems)的模式系统(model system)，同时变形杆菌也是一种生物系统实例，在该生物系统中，局部动力-分期结构决定系统的立体动力。对变形杆菌的研究与其他系统有相似的关联性，如肿瘤生长，以及年龄、体积、肿瘤和免疫细胞的激活水平等生理学构造和过程，对评价系统空间行为具有重要作用［1］。本研究探讨低湿度培养环境对变形杆菌集群运动生长模式的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验菌株奇异变形杆菌(Proteus mirabilis，PM)由本实验室保存。

1.1.2 培养基LB培养基：胰蛋白胨1%，酵母提取物0.5%，NaCl 1%，各成分溶于蒸馏水，调pH至7.2～7.4，加入2.5%琼脂，高压灭菌。临用前加入0.05%三苯基四氮唑(TTC)及0.1%葡萄糖，制成平板。

1.2 方法

1.2.1 平板含水量测定将已经高压灭菌的LB培养基溶化，待其温度降至50℃左右按比例加入TTC、葡萄糖混匀，制板，室温冷凝，37℃、倒置、敞口烤板，0 h称重(M0)、0.5 h称重(M0.5)、2.5 h称重(M2.5)，2.5 h后37℃、正置、敞口烤板至干，恒重后称重(M∝)，设0 h含水量(H)为100%，计算0.5 h及2.5 h的平板相对含水量：

1.2.2 低湿度诱导培养将已经高压灭菌的LB培养基溶化，待其温度降至50℃左右按比例加入TTC、葡萄糖混匀，制板，室温冷凝，37℃倒置、敞口、无菌烤板2.5 h，中心点种奇异变形杆菌37℃培养3 d。平行培养3皿。

1.2.3 不同区域菌体传代培养如1.2.1方法制备培养平板，37℃倒置、敞口、无菌0.5 h，同一平板中对称点种外环菌与内环菌37℃培养24 h。连续培养3代，计算菌落直径比值反应集群运动增殖速率差异。

1.2.4 不同区域菌体……