超声法优化山楂叶中黄酮类成分的提取工艺

张海红,刘红彬

(河北北方学院基础医学院药学系,河北张家口075000)

山楂叶系蔷薇科植物山里红 (Crataegus pinnatifida Bge.var.majoy N.E.Br.)或山楂 (Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥叶子[1],主要含有黄酮类化合物.研究表明,山楂叶中黄酮类化合物具有抗自由基、抗氧化、抗癌、抗肿瘤作用,还具有抗糖尿病及其并发症等多种药理及保健作用[2-6].山楂叶中黄酮类成分的提取,目前广泛使用的是甲醇索氏回流提取[1].但此方法存在提取温度较高、耗时、溶剂消耗大等缺点.本研究采用正交实验对影响超声提取的因素如甲醇浓度、甲醇用量、提取次数和提取时间进行考察,优化山楂叶黄酮类成分的提取工艺.

1 仪器和试剂

1.1 仪器

KQ-250E型超声波清洗器 (昆山市超生仪器有限公司);RE-52AA旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂);Lab Tech UV紫外/可见分光光度计 (北京莱伯泰科仪器有限公司).

1.2 材料

山楂叶 (采自河北省张家口市);芦丁 (中国药品生物制品检定所,批号100080-200707);甲醇、无水三氯化铝、亚硝酸钠、硝酸铝、均为分析纯.

2 方法和结果

2.1 标准曲线的制备

精密称取干燥至恒重的芦丁20 mg,置100 mL容量瓶中,甲醇定容.精密量取1、2、3、4、5 mL置25 mL容量瓶中,各加水至6 mL,加5%亚硝酸钠溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加氢氧化钠溶液10 mL,再加甲醇至刻度,摇匀,静置15 min,在508 nm处测定吸光度.以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,得出回归方程为y=11.775x-0.0358,R2=0.9999,芦丁在8～40μg/mL范围内线性关系良好 (见图1).

图1 芦丁的标准曲线

2.2 最佳提取工艺的优化

在单因素实验的基础上对山楂叶中黄酮类成分的最佳提取工艺进行考察,精密称……