组织工程PHBHH多孔材料喉支架的制备与细胞相容性研究△

孙安科 胡平 李万同 孟庆延 陈伟 唐维维

目前以种子细胞和生物材料为基本要素、以再生和应用预定形态软骨组织为基本目标的软骨组织工程研究正深入展开。喉是全身软骨组织相对集中的部位，生理功能与美学意义依赖支架软骨的完整性，喉软骨腔状支架的特性决定了应用组织工程技术构建过程中继续探索合适生物材料及其塑形技术的重要性。与简单的再生片状软骨不同，作为喉支架形态软骨组织工程生物材料，除了应具有良好的生物相容性、适宜的降解性和合理的孔隙结构外，还应具有足够的机械强度和灵活的塑性要求。本研究在软骨组织工程研究的基础上[1，2]，尝试应用新型生物材料聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物[poly(3-hydroxybutyrate-co -3-hydroxyhexanoate，PHBHH)]来探索组织工程生物材料喉支架形态塑形物的制备及其与软骨细胞的相容性，为组织工程喉软骨的进一步研究提供参考。

1 材料与方法

1.1主要仪器、试剂和材料 聚羟基丁酸酯与聚羟基己酸酯共聚物(PHBHH，分子量为60万，清华大学化学工程系提供)。DMEM/Ham-F12培养基(Gibco,美国)，Ⅱ型胶原酶(Sigma,美国)，多聚赖氨酸(Mr:18.9万；Sigma,美国)，胎牛血清(Fatal bovine serum,FBS,浙江四季青生物制品公司)，胰蛋白酶(Sigma,美国)，氯仿(上海化学试剂有限公司)，乙醇(上海化学试剂有限公司)，倒置相差显微镜(Olympus,日本)，扫描电镜(日本日立S550)，CO2培养箱(Queue,美国)。新西兰白兔乳兔和成兔(沈阳军区实验动物中心)。

1.2多孔PHBHH制备及其喉支架形态塑形

1.2.1塑形模具制备 以成年人全喉软骨形态为塑形参照，按3：1缩小制备出塑钢模型。……