登革2型病毒与整合素β3相互作用机制的研究

明 颖，高 娜，张俊磊，陈 辉，王 娟，范东瀛，吴江漫，安 静

登革病毒（dengue virus,DV）为黄病毒科单股正链RNA 病毒，仅含有一个开放读码框，编码3 个结构蛋白（C,prM 和E）以及7 个非结构蛋白（NS1～NS5）。依E 蛋白抗原性的不同，DV 分为4 个血清型（DV1～4），以埃及伊蚊和白纹伊蚊为传播媒介，引起人类的登革热（dengue fever,DF）、登革出血热/登革休克综合征（dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome,DHF/DSS），后者症状较重，有明显的出血倾向，病死率高，但发病机制尚不明确，目前多数学者认为可能与血管内皮细胞（vascular endothelial cell,VEC）功能改变或者结构改变有关[1-2]。

整合素是广泛分布于细胞表面的跨膜糖蛋白受体，由α 和β 亚单位组成。作为信号受体，不仅介导细胞与细胞之间、细胞与细胞外基质之间的相互作用，并在细胞的生长、移行、增殖和分化等诸多生理过程中亦发挥重要作用。已知VEC 表面分布着丰富的整合素β1 和β3。有研究发现，整合素β3 对维持毛细血管的完整性、调节血管通透性方面具有重要作用[3-4]。在前期研究中，我们发现DV2 进入哺乳动物株ECV304 细胞需要整合素β3 分子的参与[5-6]。但有研究表明，依据细胞类型的不同，介导DV 吸附和进入宿主细胞的蛋白分子有所不同[7-9]。本实验旨在探讨DV2 感染VEC 株EA.hy926过程中，整合素β3 的可能作用及其与之相互作用的病毒蛋白，在观察DV2 感染后整合素β3 表达变化的基础上，进一步将表达DV2 各个蛋白的质粒转染EA.hy926 细胞，分析病毒蛋白与整合素β3表达及共存关系，期望为深入阐明DV 致病机制提供有价值参考资料。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 细胞株和病毒株 EA.hy926、C6/36 和Vero细胞由本教研室保存。DV2（Tr1751 株）分离自登革热患者，由日本感染病研究所大谷明博士惠赠。……