何永云,梁广智,刘晓影,孙 岩,高玉光
(山东潍坊医学院口腔医学研究所,山东潍坊 261053)
Runx 2在牙釉质形成中的作用研究
何永云,梁广智,刘晓影,孙 岩,高玉光
(山东潍坊医学院口腔医学研究所,山东潍坊 261053)
目的:研究小鼠成釉细胞中Runx 2对釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblastin,AMBN)、牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因表达的调控作用,为研究Runx 2在牙釉质形成中的作用奠定基础。方法:通过RT-PCR法从小鼠成釉细胞中克隆得到Runx 2全长基因,测序正确后将其亚克隆至pcDNA3.1-hisA载体中;构建针对小鼠Runx 2的siRNA表达框架,将反应质粒pcdna-3.1-HisA-Runx2及针对Runx2的特异性小分子干扰RNA(siRNA)分别转染小鼠成釉细胞,用RT-PCR方法检测Runx 2,AMTN,AMBN以及ODAM的mRNA水平。结果:转染的小分子干扰RNA(siRNA)对Runx 2 mRNA的表达有显著性抑制作用,Runx 2基因沉默可显著抑制AMTN和AMBN的mRNA表达水平;Runx 2基因过表达可显著上调AMTN和AMBN的mRNA表达水平。Runx 2基因的表达变化对ODAM的mRNA表达水平则无显著性调控作用。结论:Runx 2通过调控AMTN和AMBN的表达水平,在牙釉质形成过程中发挥作用。
核心结合因子;釉成熟蛋白;成釉蛋白;牙成釉细胞相关蛋白;RT-PCR
[牙体牙髓牙周病学杂志,2011,21(2):62]
[Chinese Journal of Conservativedentistry,2011,21(2):62]
Runx 2称为核心结合因子,又名Cbfal,在成骨细胞的分化中起着关键的作用,最近研究[1]显示它也参与了牙齿发育的信号网络调控,Runx基因敲除小鼠可以导致牙胚钟状期发育不全,从而使新生小鼠牙齿特异性细胞的分化受阻,导致牙本质异常和牙釉质缺失。国内外许多研究发现,在动物牙齿发育中cbfal的表达有时空特异性[2-3]。然而,迄今为止在人牙胚研究领域尚未发现进一步的报道。近来发现cbfal共有3种同形异构体,他们均在牙胚中有表达[4]。……