鳡β-肌动蛋白基因的克隆及表达分析

郁建锋，王 蕾，张燕萍，李建林，顾志良

（1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点实验室，江苏 无锡 214081；2.常熟理工学院 生物与食品工程学院，江苏 常熟 215500）

肌动蛋白（actin）在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等过程中发挥着重要的作用.为了克隆鳡(Elopichthys bambusa)β-肌动蛋白(β-actin)全长cDNA，采用反转录PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends，RACE）技术，从鳡肌肉获得全长为1775bp的β-ac⁃tin cDNA序列，其中包含1128bp的开放性阅读框，编码375个氨基酸，5′-非翻译（UTR）区为98个核苷酸，3′-UTR区为549个核苷酸.核苷酸与氨基酸的同源性分析发现，鳡β-actin与鲤形目类硬骨鱼的同源性均在98%以上，其中与团头鲂（Megalobrama amblycephala）的同源性最高，分别为98.94%和99.73%，而与其他脊椎类动物如哺乳类、鸟类、两栖类的同源性也分别在85%和97%以上，说明该基因在生物的分子进化过程中具有很高的保守性.采用核苷酸系统发育分析结果显示鳡β-actin与鲤形目类硬骨鱼聚类在一起，且与团头鲂的亲缘关系最近.RT-PCR分析结果显示，β-actin基因在鳡的肝脏、肾、肠、脑、心脏、鳃和肌肉等7个组织均有表达.

鳡；β肌动蛋白；克隆；表达

肌动蛋白(actin)是构成真核生物细胞骨架和肌小节的主要成分，在细胞生理活动方面，如维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等过程中发挥着重要的作用[1,2].脊椎动物细胞肌动蛋白由多个基因组成的家族所编码，一般由375～377个氨基酸残基组成，有6种异构体，分为α、β、γ三类：两个横纹肌（α-骨骼肌型，α-心肌型），两个平滑肌（α-血管平滑肌型，γ内脏平滑肌型），两个细胞质型（β和γ亚型……