常用病毒载体的基础研究及临床应用

潘志敏，马 勇，程细高

(南昌大学 第一附属医院，江西 南昌 330006)

基因治疗是指能将外源基因导入靶细胞并有效表达从而实现治疗疾病的一种疗法。如何选择高效、低毒、靶向性强的载体，以协助目的基因进入靶细胞并正确表达，是基因治疗过程中必须解决的问题［1-2］，也是基因治疗研究领域的核心技术之一。基因载体主要分为病毒载体和非病毒载体两类［3］。病毒载体具备传送其携带的基因组进入其他细胞并进行感染的分子机制［4］，包括逆转录病毒(Retrovirus，Rv)、腺病毒(Adenovirus)、慢病毒(Lentivirus，Lv)、腺相关病毒(Adeno associated virus，AAV)及杆状病毒(Baculovirus)等。

1 Rv载体

1.1 Rv及其载体的结构

Rv在逆转录酶的作用下能将RNA转变成cDNA的单链RNA。其产物cDNA可进入细胞核并整合在染色体中随宿主细胞的增殖而转录翻译。Rv的RNA基因组核心部分含三个开放读码区:gag-编码病毒核心蛋白，PoL-编码逆转录酶，env-编码病毒被膜蛋白［5］。利用这些结构可将Rv设计成一种复制缺陷性病毒，使其能携带某些目的基因。

1.2 Rv载体的优缺点及改良

Rv载体的优点有:(1)宿主范围广，对细胞感染率可高达100%;(2)能持久表达目的基因;(3)有强启动子，能高效稳定表达外源基因;(4)感染细胞不产生病变。Rv载体也有不足:(1)只能整合至分裂期细胞;(2)插入诱变，引起机体免疫反应;(3)双嗜性Rv载体也不能解决感染特异性靶细胞问题。针对这些问题，研究者们不断寻找解决方案:Roux等曾提出用双特异性分子桥来解决感染特异性靶细胞问题。此分子桥既可与病毒颗粒结合，也可与特异细胞表面受体结合，从而引导病毒趋向特异性靶细胞。……