穆艳娥,王拴福,姬青云,柴生武,邓利爱,张东红,石维山
(山西省薯类脱毒研究中心,山西 太原 030006)
利用组织培养技术进行马铃薯脱毒试管苗快繁时,常常会出现不同程度的污染,在高温高湿的情况下污染更为严重,导致组织培养工作的失败,造成严重的经济损失。因此,在组织培养过程中,控制污染是非常重要的技术环节。本文主要从污染的主要病原及症状、常见的污染及产生原因方面进行了阐述,并提出了相应的防治措施。
污染产生的病原主要有细菌和真菌两类。细菌污染的症状出现较快,一般在接种1~2天即可出现,表现症状为在培养基或材料表面常出现黄色、粉液状半透明膜状。真菌污染的症状出现比细菌慢,一般在接种5~10天才有所表现,表现症状为初期如针状的雾斑,以后长出菌丝,继而很快出现黑、白、黄、绿等色的孢子。
主要是由于材料本身或培养基灭菌不彻底造成的。接种前如果培养瓶清洗的不干净而灭菌又不彻底,耐高温的杂菌不能被杀死,接种前培养基就会被细菌污染;接种时如果工作人员操作不规范,使用未消毒或消毒不彻底的器械或者是用手接触器皿边缘或材料,也可导致接种后外植体周围出现细菌污染。
接种前培养基就出现了真菌污染,其原因多数是由于封口不严或培养基存放的环境中孢子浓度过大造成的;其次,如果母液储备液被污染,也能引起培养基表面大量真菌污染。……