牛非结核分枝杆菌分离与鉴定

王铁峰,张 宇,钱爱东

(吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春 130118)

非结核分枝杆菌(Nontuberculousmycobacterium,NTM)广泛存在于环境中,它能够引发类结核样病变,为结核病的及时防治带来一定的困难[1]。同时,由于其种类多、耐药性多变的特点,也造成了对其鉴别防治的困难。由于国内外没有非结核分枝杆菌鉴别分类的标准操作程序,所以目前对非结核的流行情况调查及分离鉴定数据非常少,使得NTM的科研工作缺少了一定的理论数据,本试验对吉林省内牛NTM的流行情况做了调查,分别采用了生物化学、分子生物学、实验室常规染色等方法进行了细菌的分离鉴定工作,最终得到吉林省境内近年来牛NTM的新的流行情况。

1 材料与方法

1.1 标准菌株和待检样品 试验所用标准菌株偶发分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、戈氏分枝杆菌、瘰疠分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌均购于中国科学院微生物研究所。鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和副结核分枝杆菌为吉林农业大学微生物教研室保存的国际标准株。

待检样品:试验中从吉林省长春市、德惠市、双阳市、九台市、白城市、四平市、通化市等多个地区采集牛的颌下淋巴结与肠系膜淋巴结作为待检样品。1.2 分离培养基 本试验采用改良罗杰氏培养基(L-J)进行NTM的分离与扩增培养。培养基按照《病原细菌检验技术》中的方法配制。

1.3 各种主要试剂 柠檬酸铁铵、亚碲酸钾、α-荼胺、吐温-80等生化试剂均购自北京化工厂;酚酞二硫酸三钾购自比利时ACROS化学公司;限……