822例地中海贫血患者基因检测结果分析

蓝柳燕，王 君，林漫燕

(汕头大学医学院第二附属医院检验科，广东 汕头 515041)

据WHO估计，全世界约有4.5%的人携带有血红蛋白病致病基因，每年出生的各类重型地贫患儿数至少有20万。地中海贫血(以下简称地贫)是我国南方各省影响最大、发病率最高的遗传病之一，其主要发病机制是由于人体基因突变或缺失而导致α与β珠蛋白肽链合成速率的不平衡，从而引起的溶血性贫血。目前该病尚无理想的治疗方法，预防与监控是降低地贫发生率的有效方法。而预防与监控的关键是对婚前、育龄男女进行地贫筛查，从遗传角度来阻断地贫儿的繁殖。本地区属于地贫高发区域，我们对822例疑诊为α、β地中海贫血患者进行基因检测，结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

1.1 .1对象 自愿参加地贫筛查的新婚或育龄夫妇及来本院就诊怀疑为α、β地中海贫血患者共822例。

1.1 .2对照 阴性对照为正常人全血提取DNA、阳性对照为Markers，均由深圳亚能公司提供。每次实验均同时做阴、阳性对照。

1.2 检测方法

1.2 .1外周血DNA提取 抽取患者外周血2ml，EDTA抗凝，严格按试剂盒说明书进行，快速从抗凝全血中抽提DNA。

1.2 .2 检测试剂 用α、β地中海贫血试剂盒，由我院检验科基因诊断中心严格按照说明书统一操作和判断结果。

1.2 .3仪器 仪器采用杭州博日公司生产的Linegene扩增仪，并严格按照以下条件进行扩增：α-地贫：96℃ 15min 变性；98℃ 45s、64℃ 90s、72℃ 3min扩增 35个循环；72℃延伸 5min，取 2～8μl PCR 扩增产物+2μl 6×溴酚蓝上样缓冲液，混和均匀后经1.2%的琼脂糖凝胶于电压5V/cm电泳约60～90min，

图1 α-地中海贫血 (-SEA/aa正常对照 -a4.2/-SEA)