植物生长调节剂在魔芋愈伤组织培养中的应用研究

欧阳达,张淑贞,付腾腾,戴思维 (长江大学农学院,湖北荆州434025)

魔芋 (Amorphophalms konjac)为天南星科魔芋属多年生草本植物,中国为其主产国之一,其主要成分为葡甘露聚糖,是一种重要的保健食品,同时是一种新材料和新资源,因而广泛用于医药和工业。近年来深加工产品出口量加大,市场需求量大,供不应求,导致产业结构调整,使魔芋成为山地主要的经济作物之一。而传统的繁殖方法效率低下,使魔芋的品质下降,阻碍了魔芋的大面积生产,制约着魔芋产业的发展。近些年,很多研究者将植物组织培养技术应用于魔芋的种球繁殖上,试图解决魔芋的种苗短缺和品质下降等问题,取得了一定效果[1～6]。本研究通过对魔芋的愈伤诱导、分化和生根诱导等进行试验,试图为魔芋良种繁育和产业化提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为魔芋块茎,采用野生的魔芋块茎为外植体,经过严格的消毒处理后用于实验。以MS(蔗糖30g/L、琼脂8g/L、pH5.8)为基本培养基,通过与植物生长调节剂结合形成不同的组合培养基。选用的植物生长调节剂为NAA和6-BA。

1.2 材料处理及外植体灭菌

将采集的材料洗净,置于无菌操作台上,然后切成2cm×2cm×2cm小方块,放入70%的酒精浸泡约1min,然后用0.1%HgCl溶液中灭菌10min,然后用无菌水冲洗5次,切割成5mm×5mm×5mm小方块,接种于培养基上。

1.3 愈伤组织诱导

以MS为基本培养基,附加6-BA和NAA不同水平形成不同的组合培养基:组合培养基CM1组成为MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,CM2为MS+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,CM3为MS+1.50mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA,CM4为MS+1.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA,CM5为MS+1.0mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA。在避光、(26±2)℃条件下进行组织培养。

1.4 愈伤组织继代及分化

继代培养基:CM2和CM4、CM2+柠檬酸和CM4+柠檬酸、CM2+维生素C和CM4+维生素C。……