重组Runx3腺病毒联合顺铂对小鼠肝癌移植瘤生长抑制作用研究

张 静,任松森,许光华,张海元 (长江大学医学院,湖北荆州434023)

肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)是人类常见的消化道恶性肿瘤,其发生发展同其它恶性肿瘤一样存在细胞周期调控基因的改变。在利用顺铂 (cisplatin,DDP)等化疗药物治疗过程中,因化疗药物毒副作用较大并经常产生耐药性,影响化疗效果。近年来人们从改变细胞周期着手抑制肿瘤细胞生长开展了多种研究[1-3],实验证明p21、FUS1等抑癌基因能明显增强肿瘤细胞对顺铂等化疗药物的敏感性。重组腺病毒介导的基因治疗最为广泛且安全可行,本研究拟采用低剂量的顺铂和重组Runx3腺病毒联合应用于小鼠的人肿瘤模型,以探讨其在动物体内是否具有协同作用,从而在今后临床治疗中,通过联合用药减少肝癌患者顺铂的使用剂量,降低顺铂对患者的毒副作用及耐药性。通过本项目的实施,有望获得全新的抗肝细胞癌生物治疗方案。

1 材料与方法

1.1 材料

H22肝癌细胞株由新加坡国立大学肿瘤研究所馈赠,小鼠腹水传代。6～8周龄健康小鼠40只,雌雄各半,体质量18～22g。DDP购于锦州九泰药业公司,空腺病毒Ad(GFP+)由四川大学馈赠,Ad-Runx3由本课题组构建。

1.2 方法

1.2.1 荷瘤小鼠模型的建立 无菌操作,取H22小鼠腹水,台盼蓝染色,光镜下瘤细胞计数,活瘤细胞＞90%,调整细胞浓度为5×106个/ml,分别取0.2ml于右腋皮下注射,制成实体型荷瘤鼠模型,2周后于小鼠右腋皮下形成H22肝癌细胞系移植瘤。

1.2.2 实验分组与治疗 20只荷瘤小鼠随机分成4组,即对照组 (生理盐水0.2ml)、Ad-Runx3组(3×1010pfu/ml)、DDP组 (10mg/kg)、联合治疗组 (Ad-Runx3+DDP组),每组5只。……