检测慢性乙型病毒性肝炎患者血清硝基酪氨酸的意义

孟连柱 高 爱武 韩 丽娟 边 剑飞 杨胜芬

病毒性肝炎的发病机制至今尚未完全明了，很多研究证明氧化应激(oxidative stress，OS)是很重要的影响因素，病毒性肝炎患者体内存在严重的氧化/抗氧化失衡状态［1］。硝基酪氨酸(NT)常在病理状态下伴随活性氧和活性氮的增加而产生，NT作为一种蛋白质翻译后修饰，可反映蛋白质硝基化程度。本研究通过检测慢性乙型病毒性肝炎不同程度肝损害患者血清NT水平，探讨慢性乙型病毒性肝炎病情进展中的氧化损伤。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择慢性乙型病毒性肝炎患者40例，其中男27例，女13例，符合中华医学会肝病学分会及中华医学会感染病学分会2000年联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》［2］的诊断标准。其中病毒性肝炎乙型慢性重度组(慢重肝)20例，男15例，女5例;年龄13～45岁，平均年龄(30±10)岁。病毒性肝炎乙型慢性轻度组(慢轻肝)20例，男16例，女4例;年龄15～46岁，平均年龄(26±10)岁，无其他因素导致肝损害因素。正常对照组20例，男13例，女7例;年龄14～44岁，平均年龄(27±10)岁。所有患者均除外甲肝病毒(HAV)、丙肝病毒(HCV)、丁肝病毒(HDV)及戊肝病毒(HEV)的混合或重叠感染及免疫性疾病，入选前半年内未使用过抗病毒药物及免疫抑制剂，健康对照组HAV、HCV、HDV及HEV检测均为阴性。3组年龄等一般资料差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2 标本采集及测定 所有研究对象均于晨醒5 min内抽取肘静脉血3 ml，混匀，4℃，3 000 r/min离心15 min，分离血清－70℃保存待测血清NT。所有标本一批次由同一人、同一时间检测。NT应用酶联免疫吸附法测定，试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供。

1.3 统计学分析应用SAS 8.0统计软件，计量资料以±s表示，采用因素与差分析，两两比较采用q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

正常对照组、慢重肝、慢轻肝患者血清NT水平分别为(2.3±1.5)、(3.8 ±2.6)和(5.4 ±3.3)ng/ml，慢轻肝患者与对照组相比，慢重肝与慢轻肝患者组相比血清NT浓度均升高(P＜0.05)，慢重肝与对照组比升高更显著(P ＜0.01)。

3 讨论

蛋白质硝基化一般是指蛋白质中的酪氨酸硝化成NT。NT的产生可引起细胞内蛋白质及酶变性、DNA损害，最后导致细胞死亡或凋亡。常在病理状态下伴随活性氧和活性氮的增加而产生，在氧化应激存在条件下，明显升高［3，4］，并且随着病情的加重而升高，通过检测血清NT水平可以预测肝损伤的程度，从而间接反映OS的程度［5］。林亚杰等［6］对慢乙肝氧化损伤研究指标丙二醛(MDA)结果提示随着病情的加重，MDA是增高的，重症患者氧化损伤重于轻症患者。

本研究将研究对象分为3组，即正常对照组、慢轻肝及慢重肝，3组平均年龄差异无统计学意义(P＞0.05)，除外其他致NT升高的疾病，除外吸烟、饮酒、药物等诸多因素的干扰，结果发现血清NT水平在慢轻肝患者组比正常对照组明显升高，慢重肝患者组进一步升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。表明慢轻肝患者有着较高水平的蛋白质硝基化标志物产生，提示慢轻肝患者存在OS，慢重肝患者比慢轻肝患者有着更高水平NT，表明慢重肝患者存在更强的OS，我们的研究显示无论是病毒性肝炎乙型慢性轻度组(慢轻肝)患者还是病毒性肝炎乙型慢性轻度组(慢重肝)患者机体内均存在氧化损伤改变。这与马邵等［5］研究结果亦有相似之处。

1 吴娜，蔡光明，何群.氧化应激与肝脏损伤.世界华人消化杂志，2008，16:3310-3315.

2 中华医学会传染病与寄生虫学分会/肝病学分会.病毒性肝炎防治方案.中华肝脏病杂志，2000，8:324-329.

3 Pacher P，Beckman JS，Liaudet M，et al.Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease.Physiol Rev，2007，87:315-424.

4 池泉，黄开勋.蛋白质酪氨酸硝化研究.化学进展，2006，18:315-424.

5 马邵，叶青，郭帅.检测肝损伤患者的血清3-硝基酪氨酸的临床意义.新医学，2009，40:381-382.

6 林亚杰，肖伟玲.慢性乙型肝炎患者氧化损伤的检测及临床意义.山东大学学报(医学版)，2006，44:706-709.