段新科,缪应业,刘小圆,郭照静,刘洪强
近年来,真菌感染已成为白血病,淋巴瘤,长期使用免疫抑制、广谱抗生素,中心静脉插管,中性粒细胞减少,血液透析,骨髓或器官移植,机械通气等特殊人群的严重感染性疾病,是医院内感染的重要部分,抗真菌药物的广泛应用导致真菌的耐药率逐年上升,病原性酵母菌的药敏试验已显得极其重要。笔者采用ROSCO纸片法和ATBFUNGUS3微量稀释法,对200株临床分离的酵母菌做药敏测试,探讨其结果的一致性、准确性。现将结果报告如下。
1.1 一般资料 选择2008-01~06临床各科室送检的血液、痰、中段尿、白带、胸水、腹水等标本所分离到的200株酵母菌。
1.2 方法
1.2.1 标准菌株 白色念珠菌ATCC90028,克柔念珠菌ATCC6258,热带念珠菌ATCC750。
1.2.2 材料 培养基:沙保氏培养基,法国科玛嘉显色培养基,改良SHADOMY琼脂,API20C AUX和ATBFUNGUS3均购自郑州博赛。Rosco药敏纸片:氟康唑(FCZ)、伊曲康唑(ITC)、酮康唑(KTC)、两性霉素 B(AMB)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、伏立康唑(VOR)购自广州乐通泰生物科技有限公司。
1.2.3 念珠菌分型 取沙堡氏培养基上已纯化的菌落在科玛嘉 (CHROMAGAR)念珠菌显色培养基平板上画线接种,37℃培养16~24 h,观察结果。根据念珠菌生长菌落在显色培养基上的颜色进行菌种鉴定,绿色—白念珠菌;蓝灰色—热带念珠菌;粉红、白色—克柔或其它念珠菌。其中非白念珠菌全部辅助以API20C AUX生化卡协助鉴定菌种。
1.2.4 药敏试验 Rosco纸片扩散法:接种液浓度为5×105CFU/ml(先配制0.5麦氏浓度,再用生理盐水1∶1稀释),用无菌棉签蘸上接种液均匀涂布于SHADOMY琼脂平皿上,待平皿表面干后,贴上Rosco药敏纸片,并用标准菌株做质控。……