人端粒酶RNA组分在宫颈脱落细胞中的表达及临床意义

(中国医科大学附属第四医院，沈阳110032)

尽管已知高危人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染是导致宫颈癌的主要危险因素，但只有少数的感染者最终发展成宫颈癌。最近有研究提出［1］，在宫颈内瘤样病变(CIN)Ⅱ/Ⅲ级进展到宫颈癌的过程中，位于3q26位置的编码人端粒酶的RNA组分(hTERC)基因被认为是肿瘤发生过程相关的基因。我们采用荧光原位杂交(FISH)方法，从基因水平检测hTERC在正常宫颈、CIN和宫颈癌中的扩增情况，为临床子宫颈癌的筛查、诊断、治疗提供实验依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2009年1月～2010年12月我院妇科门诊、病房和体检中心行子宫颈癌筛查的患者128例，年龄21～60(42±5.12)岁，均未接受任何治疗。进行宫颈液基细胞学及组织病理学的检测。按细胞学分组，未见上皮内瘤变(NILM)38例，未明确诊断意义的不典型鳞状细胞(ASC-US)28例，不除外高度上皮内病变的不典型鳞状细胞(ASC-H)12例，低度鳞状上皮内病变(LSIL)15例，高度鳞状上皮内病变(HSIL)41例和鳞状细胞癌(SCC)3例;按组织学分组分为正常或慢性宫颈炎20例，CINⅠ级28例，CINⅡ级27例，CINⅢ级25例和SCC组28例。20例正常子宫颈建立阈值。

1.2 方法

1.2.1 细胞标本采集 采用新柏氏TCT液基细胞制片技术，用于细胞学诊断。阴道镜下进行组织活检或宫颈锥切和手术切除的子宫，标本固定后送病理科镜检，由其提供最终病理诊断结果。标本采集后，将含宫颈脱落细胞的TCT保存液(10ml)，离心、酶解、水浴将细胞滴于载玻片上制片，室温放置过夜。

1.2.2 FISH操作 玻片洗脱，自然干燥，DAPI复染，加盖玻片，暗处放置20min后进行显微镜下FISH信号观察。在暗室使用OLYMPUSB×51型荧光显微镜，DAPI/FIFC/Texas Red三色滤光镜激发观察间期细胞荧光杂交信号，并用Video-Test公司提供的FISH分析软件进行图像分析。……