HPLC法测定咳特灵糖浆中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度

江 溱

广西古方药业有限公司，广西 南宁 530221

咳特灵糖浆其处方为小叶榕干浸膏，马来酸氯苯那敏两味药组成的复方制剂。功能为镇咳，祛痰，平喘，消炎，用于咳喘及慢性支气管炎。而马来酸氯苯那敏为第一代抗组胺药，可明显改善鼻塞、流涕等感冒引发的过敏症状，稍有过量极易引发头晕、嗜睡等严重不良反应。为了更好的控制该制剂的质量，保证药品使用安全、有效，本文采用HPLC法测定了马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度。

1 仪器与试药

LC－10AP型高效液相色谱仪 (日本岛津公司);SPD－10Avp紫外－可见检测器;LC－10ATVP7725(i)型手动进样器;威玛龙色谱数据工作站;Aglient 8456紫外可见分光光度计;kh－250db型超声处理器 (昆山禾创超声仪器有限公司)。

马来酸氯苯那敏对照品 (购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号:100047－200305);咳特灵糖浆(购自A厂，共3批);乙腈为色谱纯;其余试剂为分析纯，水为超纯水。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱为Kromasil柱C18(4.6×250mm，5μm);流动相为乙腈 －水 －磷酸 －三乙胺 (11∶89:0.35:0.35)，流速为1.0ml/min，检测波长为264nm，进样量为10μl;柱温为室温;理论塔板数按马来酸氯苯那敏计算应不低于2500。在上述色谱条件下，供试品中马来酸氯苯那敏能完全分离，对照品与阴性对照品溶液中没有峰重叠，色谱图见图1。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏对照品适量，加流动相稀释成每1ml中含马来酸氯苯那敏40μg的对照品溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，置50ml容量瓶中，加流动相30ml，超声 (250W，50kHz)处理30分钟，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，以上述色谱条件测定，根据马来酸氯苯那敏峰面积，以外标法计算供试品中马来酸氯苯那敏含量。

2.5 线性关系考察 精密称定马来酸氯苯那敏对照品约10.0mg，置100ml棕色量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成100.0μg/ml对照品溶液，备用。分别精密吸取上述对照品溶液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0ml，分别置10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，进样测定。以对照品进样浓度为横坐标(X)，峰面积积分值为纵坐标 (Y)绘制标准曲线，回归方程为:Y=5973.6X－3462.8，相关系数r=0.9992。结果表明:马来酸氯苯那敏进样浓度在20.0～70.0μg/ml范围内，进样浓度与马来酸氯苯那敏峰面积呈良好线性关系。

2.6 精密度试验 分别精密吸取马来酸氯苯那敏对照品溶液 (40.0μg/ml)和供试品溶液 (批号20091201)各10μl，注入液相色谱仪，连续进样5次，依次测定峰面积值，记录色谱图，测定马来酸氯苯那敏峰面积，其 RSD为0.78%，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性试验 取供试品溶液 (批号20091201)，每隔4小时分别进样10μl，测定峰面积值，其峰面积RSD为1.11%，表明供试品溶液在20小时内保持稳定。

2.8 重复性试验 取同一批号供试品 (批号20091201)共5份，每份10ml，精密量取，按样品测定项下方法进行提取，测定，结果测得平均值 (相当于标示量)=98.0%，RSD%=0.27，表明重复性良好。

2.9 阴性对照试验 按处方比例制成缺马来酸氯苯那敏的阴性样品，按上述供试品制备方法制成缺马来酸氯苯那敏阴性溶液。然后上述色谱条件进行测定，结果在马来酸氯苯那敏出峰位置无其它干扰峰，表明处方中其它成分对测定无干扰。

2.10 加样回收率试验 加样回收试验:取已测知含量的供试品 (批号20091201，含量:0.2058mg/ml)5份，每份约5.0ml，精密称定，置50ml容量瓶中，精密加入400μg/ml马来酸氯苯那敏对照品溶液 (精密称取马来酸氯苯那敏对照品10.0mg，置于25ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，即得)2.5ml，再加入流动相30ml，按样品测定项下方法进行提取并按上述色谱条件依法测定，计算回收率，结果见表1。

表1 加样回收率试验

2.11 样品中马来酸氯苯那敏的含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液3批，按上述色谱条件测定，以外标法计算，结果见表2。

2.12 样品中马来酸氯苯那敏的含量均匀度测定:取样品3批，按供试品溶液制备方法提取，以上述色谱条件依法测定马来酸氯苯那敏含量均匀度，结果见表2。

表2 样品含量及含量均匀度测定结果

3 讨论

3.1 流动相的选择 流动相组成及配比选择:参考文献［1］［2］，曾试用甲醇－水溶液和乙腈－0.4%磷酸溶液的不同配比，摸索液相色谱的最佳测定条件，试验结果表明，选用乙腈－水－磷酸－三乙胺 (11∶89:0.35:0.35)，马来酸氯苯那敏出峰时间适宜，与其它共存成分分离度大于1.5，达到基线分离，峰型和分离度较好。

3.2 波长的选择 文献［3］采用219nm作为检测波长;文献［4］(HPLC法测定维C银翘胶囊中马来酸氯苯那敏的含量)采用262nm作为检测波长;依据《中国药典》2005年版二部，马来酸氯苯那敏片项下知本品在264nm出有最大吸收波长;故选择264nm作为本品的检验波长。

［1］郭丙炎，王岚，等.酸性染料比色法测定复方岩白菜素片中马来酸氯苯那敏的含量［J］.中国医院药学杂志，2000，20(12):725－726.

［2］郭炎荣，蒙太平.复方岩白菜秦片中两种主要成分的含量测定［J］.中国药业，2002，11(8):38.

［3］冯向东，高光伟，黄海辛.HPLC法测定感宁胶囊中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度［J］.中国药品标准，2009，10(1):59－61.

［4］罗远秀.HPLC法测定维C银翘胶囊中马来酸氯苯那敏的含量［J］.广西中医学院学报，2009，12(2):60－62.