白三叶叶蛋白提取及纯化工艺

吕宗友，赵国琦，苏衍菁，邬彩霞，陆 银，王小山

(扬州大学动物科学与技术学院，江苏 扬州 225009)

蛋白质缺乏是世界性的[1]。高等植物的叶片被认为是最有前途的蛋白质资源。植物蛋白因其廉价、资源丰富并能满足人类和家畜对蛋白质的需求，引起了人们极大的关注[2-3]。开发植物蛋白质资源成为食品业和饲料业一个亟待解决的问题。

叶蛋白又称绿色蛋白浓缩物(leaf protein concentration，LPC)，是以新鲜牧草或其他青绿植物的生长组织(茎、叶)为原料，经打浆压榨后利用蛋白质等电点原理从其汁液中提取的高蛋白浓缩物[4]。白三叶(Trifoliumrepens)是一种豆科牧草，其青饲利用期长、粗蛋白质含量高、管理粗放、柔软细嫩，是重要的种植牧草和观赏草坪草[5-7]。目前，牧草中的苜蓿(Medicagosativa)[8]、聚合草(Symphytumperegrinum)[9]、串叶松香草(Silpniumperfoliatum)[10]、酸模(Rumexacetosa)[11]、黑麦草(Loliumperenne)[12]的叶蛋白开发均有报道，而白三叶叶蛋白的研究较少。本试验通过对白三叶叶蛋白提取和纯化条件的探讨，为其开发利用提供参考。

1 材料与方法

1.1材料 白三叶于2010年4月中旬采自扬州大学动物科技学院草业科学牧草标本区。

1.2仪器 SGL-300食品料理机(天津达康电器公司)；101型电热鼓风干燥箱(上海市实验仪器总厂)；凯式定氮仪(天津玻璃仪器厂)，用于粗蛋白质的测定，按照张丽英[13]提供的方法进行；HSS-I(B)恒温浴槽(成都仪器厂)；Sartorius酸度计[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司]；SHB循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。

1.3试验步骤

1.3.1叶蛋白的提取步骤 均匀称取鲜样50 g，剪成1 cm左右的小段，按试验要求加入规定量的水，打浆4 min，用3层滤布压滤浆液，弃草渣，将滤液调节到规定的pH值后于水浴中快速加热至规定的温度，恒温不同的时间，得絮凝物，过滤得叶蛋白膏，65 ℃烘干得叶蛋白浓缩物成品(图1)。……