双流冬草莓的脱毒复壮技术

□韩春梅

双流冬草莓是四川省双流县特产，为中国国家地理标志产品。双流冬草莓因在春节前上市而得名。经双流县20世纪引种后不断地更新、提纯复壮及适宜的气候条件，双流冬草莓品质优异，深受中国国内甚至周边国家和地区消费者喜爱。现将双流冬草莓的脱毒复壮技术归纳如下。

一、母液的配制、保存

母液A一般配制为20倍液，配制培养基是1L取50ml；母液B配制1000倍液，配制培养基1L取1ml；母液C配制1000倍液，配制培养基1L取1ml；母液D配制200倍液，配制培养基1L取10ml；母液E配制100倍液，配制培养基1L取5ml；各种激素根据培养基用途适量添加。将配好的母液保存在4℃的冰箱里，同时注意保存时间不宜太长，一般在7天左右用完，以免失效。

二、MS固体培养基的配制、装瓶、密封

MS固体培养基的配制方法：将配制好的母液按顺序排好，并检查是否出现沉淀或变色，然后用适应的量筒量取适量的母液放在容器内，并用移液管移取所需生长激素；再将称取好的琼脂和蔗糖放入加热容器内，用1mol/L盐酸或氢氧化钠调至所需的pH值，加热至沸腾。培养基的装瓶一般是继代培养基20ml，生根培养基25ml。用封口膜把装好的培养瓶密封等待灭菌。

三、培养基的灭菌

固体培养基采用湿热灭菌法，即把装好的培养瓶放在高压蒸汽灭菌锅内进行高温高压灭菌。一般装好培养瓶后，相继检查灭菌锅的水位，避免干烧造成意外，同时关闭注水阀、出气阀，打开电源开关加热。待压力达到49.0kPa时，打开放气阀，排出锅内的冷空气后，继续加热至108kPa、温度达到121℃时，维持20分钟，即可关闭电源，排气到常压，开锅取出培养基。……