6株溶磷菌和4株固氮菌混合培养条件的研究

刘青海，姚 拓，马 从，李显刚

（甘肃农业大学 草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中－美草地畜牧业可持续发展研究中心，甘肃 兰州 730070）

早在20世纪1925年就有学者发现不同菌株组合混合培养可以形成不同的产物。研究认为混合培养能减少或避免纯培养过程中生物活性下降的现象，增加培养菌生物量［1］，可以获得更多的菌株性质。陶光灿等［2］研究了细菌组合的固氮，解磷与不同培养条件以及混合培养的研究表明，微生物之间存在着协同作用，这是一个潜能巨大的新的微生物资源，正在逐渐成为新的研究热点。常慧萍等［3］对小麦根际的解磷菌、解钾菌和固氮菌进行了互作研究发现：当两菌株混合后，解磷菌P1616可以促进固氮菌N2106－L生长，提高了混合菌悬液中的细胞密度，解磷菌P1616还可以促进解钾菌KL0405的生长。

温度，pH和盐分浓度对菌体生长影响很大，在微生物发酵的过程中要严格控制温度，pH和盐分浓度才能有最大的有效活菌数［4］。溶磷菌和固氮菌混合对温度、pH和盐分浓度等环境因素的响应不同，本研究旨在确定混合菌株对环境因子的适应范围，为后续溶磷菌和固氮菌混合菌剂研制提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 菌株来源

供试菌株为甘肃农业大学草地微生物多样性实验室提供的6株溶磷菌，4株固氮菌（表1）（3株联合固氮菌和1株根瘤菌）。

表1 供试菌株及来源Table 1 List and source of tested strain

1.2 菌株间拮抗反应

分别将活化后的菌株两两相交划线接种在LB平板培养基上，28℃培养2～3d，每天观察交叉点处细菌生长状况，若交叉点两细菌生长弱或不生长，说明两菌株间有拮抗作用，不适合混在一起做复合菌肥；……