不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

罗灿峤 莫木琼 钟觉民

骨组织是一种坚硬的结缔组织，由骨细胞和骨基质组成，骨基质内含大量无机盐，主要是羟磷灰石-磷酸钙和碳酸钙。由于磷酸钙和碳酸钙的存在造成骨组织的硬度较大，不易切片且极易脱片，因此在病理制片过程中，必须要进行脱钙处理，但如果骨组织脱钙过度又会严重影响组织细胞染色效果，或使组织抗原丢失，从而影响对病变组织的病理诊断或科学实验工作。因此，必须寻找一种合适的脱钙液进行骨组织脱钙。现时的脱钙液有无机酸(硝酸、盐酸、硫酸)和有机酸(蚁酸、醋酸、甲酸等)，也可以利用电解、微波等进行物理脱钙，或混和使用［1］。本研究希望通过对比各种脱钙液的脱钙效果及其后HE染色和免疫组化效果，探讨既方便临床应用，又适合科学研究的脱钙方法。

1 资料与方法

1.1 标本 选取2008年1月至2008年8月我院手术室送检的手术标本50例，其中有长骨、短骨、不规矩骨，包含骨干和骨端的骨皮质、骨髓质。

1.2 材料与设备 所有化学试剂均由广州化学试剂一厂生产;切片机、染色机和切片刀片均由英国shandan公司生产。

1.3 脱钙液的配制 14份浓硝酸加86份自来水配制成14%硝酸;10份浓盐酸加90份自来水配制成10%盐酸;盐酸20 ml，甲酸20 ml，自来水 100 ml，配制成 20% 甲盐酸;EDTA二钠盐10 g，PBS溶液100 ml(滴加NAOH溶液至溶解，然后用HCL中和至pH 7.0)配制成EDTA脱钙液。

1.4 步骤 每例标本平均分成4份，确保所有骨组织的性质都一样。新鲜骨组织及时用10%中性福尔马林水溶液固定。充分固定后，用锋利的钢锯将……