碎米荠醇沉多糖的共沉淀物分离纯化

杨大伟，钟菊英

(湖南农业大学 食品科学技术学院，湖南 长沙 410128)

碎米荠是一种具有多种药用功能的十字花科植物[1]，碎米荠多糖也拥有多种生理功能[2].在碎米荠多糖分离纯化过程中，乙醇沉淀多糖时，一种未知有机物与多糖一起被沉淀(共沉淀物)，这种共沉淀物必须与结合的多糖有效分离，才能最大程度地将碎米荠多糖提取出来，增加多糖的得率.

1 材料与方法

1.1 材料

1)试验材料：碎米荠粗多糖溶液(实验室制取).

2)主要试剂与药品：甲醇，苯酚，浓硫酸，丙酮，磷酸氢二钠，以上试剂均为分析纯.

3)主要仪器与设备：琼脂糖(sepharose) 6B凝胶层析柱，大孔树脂(AB-8)吸附层析柱，高效液相色谱仪(D10NEX 美国)，泵：P680 HPLC pump 四元梯度泵，柱温箱：TCC-100，检测器：二极管陈列检测器PDA-100，冷冻离心机，723紫外-可见分光光度计.

图1 共沉淀物洗脱曲线

图2 共沉淀物的琼脂糖Sepharose 6B凝胶层析

1.2 方法

1.2.1 碎米荠粗多糖与共沉淀物的分离方法 乙醇沉淀的碎米荠粗多糖经蒸馏水溶解后，向溶液中加入磷酸氢二钠等无机盐将结合在多糖上的共沉淀物絮凝沉淀，离心后，收集沉淀，上清液加入磷酸氢二钠絮凝共沉淀物，反复上述操作到上清液加入磷酸氢二钠无絮凝现象，保留上清液供后续多糖纯化使用，合并沉淀，将沉淀用适量的蒸馏水溶解.向溶液中加入丙酮，由于共沉淀物是依靠氢键等弱作用力与多糖结合的，采用丙酮等有机溶剂可将氢键等弱作用力破坏，从而实现多糖与共沉淀物的分离.丙酮沉淀的多糖与共沉淀……