益气健脾方对脾虚模型小鼠的影响*

河北省石家庄市第四医院 贺 克 刘 姣 李 清(石家庄050011)

益气健脾方是依据中医药理论组方，由山药、薏苡仁、莲子、黄精、百合、龙眼肉、大枣等药组方而成。其中，山药功偏补肾生精，益肺肾之阴;薏苡仁能健脾，渗湿，止泻;莲子养心，益肾，补脾;黄精可补中益气、润肺、强筋骨;百合可养阴润燥;龙眼肉能够滋阴补肾、补中益气、润肺、养血安神。故益气健脾方具有益气健脾、滋阴养血功效，具有阴阳双补的作用。本研究主要通过观察益气健脾方对大黄致脾虚模型小鼠的影响，探讨其健脾功效，现将研究结果总结如下。

1 材料

1.1 动物 健康雄性KM小鼠，清洁级，体质量18～23 g，由河北省实验动物中心提供，许可证为 SCXK(冀)2008－1－003，动物饲料亦由该中心提供。

1.2 药物与试剂 益气健脾方由山药、薏苡仁、莲子、百合、龙眼肉、黄精、大枣等组成，实验时在河北医科大学中医学院中药化学实验室水提浓缩。补中益气丸，马鞍山神鹿科瑞药业。生大黄，水提浓缩至1 g生药/mL。

1.3 主要仪器 MB10Kpw型电子天平 (上海海康电子仪器厂)，JA2003 SHP07003型精密电子天平 (上海恒平科学仪器有限公司)，BC－2300型全自动三分群血细胞分析仪 (深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)。

2 方法

2.1 分组与造模 100只健康雄性KM小鼠，体质量18～23 g，自由饮水进食，饲养于18℃ ～22℃明暗各12 h的清洁级动物实验室内，正常喂养3天后，随机分成5组，每组20只，分别为空白对照组、模型对照组、益气健脾方低剂量组、高剂量组及阳性 (补中益气丸)对照组。动物造模参考文献［1］，除空白组灌服蒸馏水0.2 mL/10 g体质量外，其余4组小鼠均灌服生大黄煎液0.2 mL/10 g体质量，每日1次，连续14日。

2.2 给药方法 于第8天起，益气健脾方高剂量组、低剂量组小鼠分别按40 g生药/kg体质量、20 g生药/kg体质量的标准灌服药物，阳性对照组灌服补中益气丸10丸/kg体质量，正常组和模型组灌服等容量蒸馏水，连续7天。

2.3 检测指标及方法

2.3.1 小鼠的体质量及外观形态的变化:自造模开始每天观察小鼠的精神、食欲、粪便、体质量变化情况。记录造模前、给药后小鼠体质量。

2.3.2 外周血细胞指标:在每组随机抽取10只小鼠，末次给药前禁食18 h，正常饮水。末次给药1 h后，摘除眼球取血，通过血液分析仪检测各组小鼠红细胞 (RBC)、白细胞 (WBC)、血红蛋白 (HGB)等血液指标，并记录数据。

2.3.3 脾指数与胸腺指数:取血后，将小鼠颈椎脱臼处死，剖开腹腔，取胸腺和脾脏，分别称量胸腺和脾脏的质量，记录数据，并按下式计算胸腺指数和脾指数。脾虚小鼠的脏器指数=免疫器官鲜质量 (mg)/小鼠体质量 (g)。

2.3.4 小肠推进率:每组剩余10只小鼠，正常饮水，末次给药前禁食24 h，末次给药后1 h，各组均灌胃0.5 mL半固体营养糊。30min后，将小鼠颈椎脱颈处死，打开腹腔，分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管。取出的小肠平铺于米尺上测量从幽门至炭末行进最远处为推进长度，幽门至回盲瓣为全长，按下式计算推进百分率。小肠推进率 (%)=炭末前端与幽门的距离/小肠全长×100%。

3 结果

3.1 对脾虚小鼠形态学的影响 以大黄水煎液灌服形成脾虚模型后，造模组体质量均低于空白对照组。给药后，模型组小鼠体质量低于补中益气丸对照组 (P＜0.05)，明显低于高剂量组 (P＜0.01)，且模型组小鼠毛色无光泽，活动情况均不如补中益气丸对照组和给药组，大便不 成形。详见表1。

表1 益气健脾方对脾虚小鼠外观形态及体质量的影响

3.2 对脾虚小鼠血细胞数的影响 与模型组相比，益气健脾方高剂量组、低剂量组小鼠WBC、HGB、RBC均有升高趋势，其中，益气健脾方高剂量组HGB显著升高 (P＜0.01)，RBC升高 (P＜0.05)。说明益气健脾方有改善外周血指标的作用。详见表2。

3.3 对脾虚小鼠免疫器官的影响 益气健脾方高剂量组小鼠的脾质量高于模型组 (P＜0.05)，胸腺质量及胸腺指数显著高于模型组 (P＜0.01)，低剂量组小鼠胸腺质量及胸腺指数高于模型组 (P＜0.05)。说明益气健脾方有增强免疫器官质量，增强免疫功能的作用。详见表3。

3.4 对脾虚小鼠小肠推进率的影响 在小肠推进率实验中，益气健脾方高剂量组小肠推进率低于模型组 (P＜0.05)，说明益气健脾方能抑制脾虚小鼠小肠运动。见表4。

表2 益气健脾方对脾虚小鼠血液指标的影响

表3 益气健脾方对脾虚小鼠脾指数、胸腺指数的影响

表4 益气健脾方对脾虚小鼠小肠推进率的影响

4 讨论

中医学认为“脾为后天之本”，脾胃为气血生化之源，脏腑经络之根，为人体气机升降之枢纽，又是人体抗御病邪的重要防卫机构。胃主受纳，脾主运化，主肌肉。饮食入胃，脾为其行精微，上归于肺，肺朝百脉，以滋养周身骨骸、肌肉，故有“内伤脾胃，百病由生”之说。若脾气虚、脾失健运，则出现一系列的功能障碍，可造成食欲不振、纳呆、消瘦等。

本实验采取大黄苦寒泻下法复制小鼠脾虚模型。中医药理论认为大黄归脾、胃、大肠经，性苦寒，具有较强泻下作用，久服可使肌体元气损伤、脾胃功能减弱，从而影响水谷精微的吸收，则气血生化无源，肌肉瘦削，神疲乏力。本实验采用小鼠灌服大黄水煎液造成脾虚动物模型。经大黄灌服后的小鼠可出现便溏、消瘦、拱背、纳呆、少动、四肢无力、毛发枯燥、畏寒、体重减轻等表现，与脾虚证临床表现基本吻合。经检测模型组小鼠外周血细胞数、胸腺和脾脏质量及指数低于空白对照组，小肠推进率高于空白对照组，经补中益气丸治疗有效，说明造模成功。

本实验应用益气健脾方治疗脾虚模型小鼠，通过发挥其温养中气，平补阴阳，调和营卫之功效使小鼠体质逐渐恢复，脾虚症状得到改善:大便成形，便溏、脱肛情况明显改善;活动增多，反应敏捷，毛发基本恢复正常光泽，很少出现成群蜷缩。与模型组相较，益气健脾方高、低剂量组能够显著升高血红蛋白量、红细胞计数、白细胞计数值，增加免疫器官胸腺、脾脏质量，抑制小鼠小肠的过快运动。提示了益气健脾方能够提高肌体的免疫力，增强肌体对有害刺激的抵抗力，从而减轻肌体的损伤，此为本方治疗脾虚证的机制之一。关于益气健脾方更为广泛的功效以及作用机制还有待于进一步的研究。

［1］徐珊，聂红明，朱君华，等.乐胃饮对脾虚小鼠小肠推进运动影响的实验研究［J］.中国中医药科技，2004，7(11):219－221

［2］金若敏，黄莉，周婉，等.中药逍遥片改善正常或脾虚小鼠肠运动相关功能 ［J］.中国临床康复，2003，7(24):3 316－3 317

［3］钱会南，沈丽波，胡雪琴.中医脾虚动物模型的实验研究思考 ［J］.中国药物与临床，2003，3(3):183－184

［4］金敬善.脾虚证动物模型的实验研究进展［J］.中国中西医结合脾胃杂志，1999，7(2):65