抗中性粒细胞胞浆抗体检测在系统性红斑狼疮患者中的应用

张小莲，徐春晴，张聪玲，刘和平

(宜春市人民医院检验科，江西 宜春 336000)

抗中性粒细胞胞浆抗体 (antineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA)指与中性粒细胞及单核细胞胞浆中溶酶体酶发生反应的抗体。当中性粒细胞受抗原刺激后，胞浆中的α-颗粒释放蛋白酶-3、髓过氧化物酶物质及白细胞抗原生成，刺激机体而产生ANCA，与临床一些炎症疾病密切相关的抗体。自从Davies等[1]在坏死性肾小球肾炎和系统性血管炎患者循环物中首先发现ANCA以来，在国际上逐渐引起人们的重视。现已证实，ANCA是系统性坏死性血管炎的血清标志抗体，被广泛应用于血管炎的诊断和鉴别诊断。Schnabel等[2]报道在SLE中仅存在核周型 ANCA(P-ANCA)，而 Pauzner等[3]报道在SLE中还发现存在胞浆型ANCA(C-ANCA)，本文用间接免疫荧光技术 (IIF)对92例SLE患者作血清ANCA的检测，以探索ANCA与SLE的关系。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例选择 SLE患者92例，均符合美国风湿病学会1982年诊断标准。正常献血员18例。所有血清标本置-20℃冰箱保存备检。

1.1.2 试剂来源 ANCA阳性参考血清、荧光素标记的羊抗人IgG均购自德国欧蒙公司。

1.1.3 所用仪器 电热恒温水浴箱 (北京东霞科学仪器厂)，荧光显微镜(日本Nikon公司)。

1.2 检测方法 间接免疫荧光法(IIF)将被检血清用PBS(pH 7.2)吐温缓冲液作1:10稀释，滴加于基质片上，置室温孵育30min，用PBS(pH 7.2)吐温缓冲液洗涤3次，每次5min，再用荧光标记的羊抗人IgG复染室温孵育30min，用PBS(pH 7.2)吐温缓冲液洗涤3次，封片。最后用荧光显微镜观察结果。结果阳性者再作1:20、1:40、1:80稀释检测。结果判断：乙醇固定的抗原底物片，荧光显微镜下可见均匀分布的中性粒细胞，阴性时中性粒细胞胞浆部分无特异性荧光染色，细胞较暗，有时有一部分粒细胞(嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞)出现颗粒荧光。……