产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析

邓江锦

（广东省揭西县人民医院，广东 揭西 515400）

近年来产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌株引起医院感染有明显增加趋势，为正确选用抗菌药物和控制院内感染流行，我科对临床各科室的产ESBLs菌株做全面检测，分析探讨产ESBLs菌株的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分布和耐药性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

307株实验菌即大肠埃希菌（ECO）和肺炎克雷伯菌（KPN）均分离自我院门诊及住院病人的不同临床标本，涉及科室包括神经外科、内科、ICU、泌尿外科、消化内科、呼吸内科、烧伤科、传染科、骨科、肿瘤科、妇产科等，包括血液、痰、粪、尿、前列腺液、穿刺液等。

表2 产ESBLs菌与非产ESBLs菌耐药率的比较

1.2 材料

头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、氨曲南（ATM）、头孢哌酮（CFP）、头孢曲松（CRO）、阿莫西林/克拉维酸（AMC）、头孢噻肟/克拉维酸（CD03）药敏纸片均购于美国辉瑞制药有限公司，氧氟沙星（OFX）、亚胺培南（IPM）等其他药敏纸片、M-H购于杭州天和生物试剂有限公司。

1.3 菌种鉴定

①ESBLs初筛实验：按《全国临床检验操作规程》[1]常规方法进行细菌分离、培养。使用Nccls（美国国家临床实验室标准化委员会）推荐方法，待检菌株K-B法制备菌液、接种平皿后常规标准纸片扩散法操作。贴两种以上头孢菌素如头孢他啶或头孢噻肟等，35℃孵育24h，测其抑菌环直径，并按可疑菌株标准纳入。②确证实验：K-B法将产ESBL的菌株接种于MH平皿，贴头孢噻肟/克拉维酸等复合剂纸片，当任何一种复合剂纸片抑菌环直径比单独药敏纸片抑菌环直径超过5mm，即可确证该菌株产ESBLs。

1.4 统计学处理

本次研究所得数据均由SPSS13.0软件统计包进行统计学处理，两组计数资料或疗效比较采用χ2检验，组间对比采用t检验，其中以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 本研究中185株大肠埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共检出87株产ESBLs菌株，总检出率为28.3%。其中ECO产ESBLs菌株检出率为28.1%（52株），KPN产ESBLs菌株检出率为28.6%（35株）。

2.2 产ESBLs菌株在各病区检出率（详见表1）。在神经外科最高，为41.7%，最低为肿瘤科13.3%。产ESBLs与非产ESBLs菌株耐药率比较（表2），产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率，除亚胺培南外，均显著高于非产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌（P＞0.05），具有统计学意义。

表1 不同科室送检标本中产ESBLs菌检出率

3 讨 论

由于三代头孢菌素等大量超广谱β-内酰胺类抗生素在临床上的应用，使细菌的耐药性发生了新的变化，由质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产生，可使β-内酰胺类抗生素的β-内酰胺环水解，丧失抗菌活性[2]。该酶主要由肠杆菌科细菌产生，是TEM-1、TEM-2及SHV-1的突变酶，能水解青霉素类、头孢菌素类及单环类抗生素，但对头霉素类和碳青霉烯类无明显作用。由于其作用广泛，可以水解头孢噻肟，或者水解头孢他啶等，因此被称作超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）[3]。

据统计，ESBLs主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生，本研究中185株大肠埃希菌和122株肺炎克雷伯菌共检出87株产ESBLs菌株，总检出率为28.3%，其中大肠埃希菌中产ESBLs菌株的检出率为28.，1%，肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为28.6%。在临床各科室都有发现产ESBLs菌株，说明抗生素临床使用的合理性还有待提高。外科主要是神经外科和烧伤病房。根据我们的调查，神经外科患者病情一般比较复杂，在抗生素使用上一般种类多且时间长，特别是头孢菌素类抗生素剂量和时间，加上患者自身因素如年龄偏大、抵抗力低，卧床时间较长等，因而容易出现产ESBLs菌株。内科以呼吸内科最高，检出率为36.1%，主要由于该科患者年龄较大，绝大部分为老年患者，不少患者超过10年慢支病史等，长年服用各种抗菌素，且不少合并有心脏等多种脏器衰竭，并发症较多，因而其检出率在内科为最高。在一定程度上说抗菌素的使用过程是培养耐药菌株的过程，使用越广泛，其敏感性就越差。ESBLs耐药范围扩大、耐药性转移广、发生率增长快以及新基因型的不断发现[4]，给临床治疗和医院感染控制带来不少困难，因而需要提高医务人员的认识，加强抗菌药物的使用，才能从根源上控制产ESBLs的菌株的局部流行。

[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].2版.南京:东南大学出版社,1997;500-509.

[2] 叶晓光,王若伦,林红燕,等.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌耐药谱动态观察[J].中华医院感染学杂志,2004,14(5):492-495.

[3] 刘朝晖,陈劲龙,叶惠芬,等.克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2003,13(4):375-377.

[4] 倪语星,毛向群,王志军.质粒介导的超广谱β-内酰胺酶的耐药性问题及检测[J].中华医学检验杂志,1999,22(增刊):19.