谢 虎,李永忠*,郭风劲,张继平,林 华,习 巍
(1.宜昌市第二人民医院骨科,湖北宜昌443000;2.华中科技大学附属同济医院骨科)
骨肉瘤是一种常见的骨的原发性恶性肿瘤,好发于青少年患者,亦称成骨肉瘤,其侵袭力强、转移早且转移率高等特点往往使得临床治疗失败[1]。虽然近几年辅助化疗、保肢手术的运用使骨肉瘤患者5年生存率和保肢成功率显著提高,但长期疗效及患者的远期存活率并无明显改善。这就使越来越多的学者将目光转向了对于骨肉瘤发生、发展、转移机制以及影响这些过程的相关因素的研究[2,3]。本研究采用免疫组化法,从蛋白水平上检测了93例骨肉瘤组织中低氧诱导因子-2α,骨桥蛋白,血管内皮生长因子,以期探讨三者在肿瘤转移、复发中的作用及相互关系,进而反映其能否作为检测骨肉瘤预后的相关指标。
1.1一般资料选用我院病理科1991年元月-2005年六月期间收治的93例骨肉瘤标本和25例瘤周正常骨组织。肿瘤直径5-26 cm,平均12 cm。组织学分型参照Dahlin分型标准[4]及WHO新分型法。全部标本经临床、病理、X线相结合确诊。患者分为初发组75例,复发组18例,伴肺转移组 20例,不伴肺转移组73例。
1.2免疫组化方法所有一抗及二抗系浓缩型,储存于-20℃冰箱备用,用前以缓冲液(0.01M的磷酸钠、0.25 M 的 NaCl、pH7.6)及稳定剂(15 mg/ml的牛血清白蛋白)按照1∶100稀释。
检测用SP法(SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司)。选用PBS代替一抗作阴性对照。
1.3评价指标①细胞核内有呈浅黄、棕或棕褐色颗粒为HIF-2α阳性,观察5个高倍镜视野(10×20倍)阳性细胞所占比例。……