姜洪伟,房学东*,朱宝平,张 伟,朱甲明,王 理
(1.吉林大学第二临床医院普通外科,吉林长春130041;2.中国水利水电第一工程局总医院)
结直肠癌是我国较常见的严重危害人民健康的恶性肿瘤之一,结直肠癌的发生发展是一个涉及多种基因改变和多阶段致癌的复杂过程,包括癌基因的激活、抑癌基因的失活和缺失、错配修复基因的突变等。其中抑癌基因的异常在结直肠癌的发生发展中起关键作用,其失活或缺失可导致细胞去调节性生长,克隆性扩张[1]。DCC基因(Deleted in colorectal carcinoma,DCC)作为肿瘤抑制基因,其与结直肠癌的相关性研究正在不断深入。DCC基因是目前发现的最长的人肿瘤抑制基因,尤其在结直肠肿瘤的发生发展中具有重要意义,其失活和表达异常与大肠癌的诊断、治疗、转移及预后关系密切。我们检测了DCC基因产物在大肠癌中的表达,并对其与结直肠癌临床、病理因素的关系进行回顾性研究,以探讨DCC基因的预后价值。
1.1标本收集吉林大学第二临床医院2008年6月—2009年6月手术切除的结直肠癌标本120例,均为腺癌,其中男性65例,女性55例,年龄22-89岁,平均66岁。Dukes分期A和B期68例,C和D期52例。所有标本经10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,切片厚 4-5 μ m,进行免疫组化染色。
1.2主要试剂一抗DCC兔抗人多克隆抗体为武汉博士德公司产品。二抗使用北京中山生物技术有限公司通用型二步法免疫组化检测试剂。
1.3方法免疫组化染色采用ABC法。
1.4结果判断标准以不加一抗的空白组为阴性对照,细胞内任何部分染成浅黄至深褐色,细胞数>5%为阳性,阳性细胞数<30%为“+”,30%-70%为“2+”,>70%为“3+”,无染色或与阴性对照组相同为阴性。……