COX-2信号通路参与高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大研究

李劲松

(重庆市双桥区人民医院 400900)

糖尿病是当前世界的流行性疾病之一,糖尿病在世界范围内的流行趋势日趋严重[1]。有研究发现,糖尿病本身可引起心脏结构和功能的损伤,出现以心肌肥厚、心室顺应性降低和峰充盈率减少为主要特征的糖尿病性心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)[2-3]。心肌肥厚是糖尿病性心肌病关键的结构改变,与糖尿病患者心力衰竭、猝死等密切相关[4-5]。环氧化酶(COX)是由花生四烯酸合成前列腺素(prostaglandin,PGs)的限速酶,分为COX-1和 COX-2两种,COX-1组成性表达,存在于正常组织中,一般浓度较低,外源性刺激不能诱导其表达;COX-2在内皮细胞、血管平滑肌细胞和心肌细胞中,可受活性氧中间产物诱导性表达,并参与氧化应激过程,其产物在炎症等病理过程中起重要作用[6-9]。有研究发现,糖尿病是一种与炎症有关的疾病,IL-1β 、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等多种促炎性细胞因子参与了糖尿病的发生、发展过程[10]。COX-2特异性抑制剂——赛来昔布是否可以抑制糖尿病心肌肥厚,目前尚未见相关报道。现将本研究利用高糖高胰岛素作为刺激因子,在离体培养的乳鼠心肌细胞进行的相关研究报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 1～3 d龄的SD乳鼠由重庆医科大学实验动物中心提供。

1.2 实验试剂 赛来昔布、多聚甲醛、PVDF膜购自Sigma公司,RIPA裂解液、BCA蛋白试剂盒购自江苏碧云天公司,PCR逆转录试剂盒、TRIzol购自TaKaRa生物工程公司,DMEM 培养基购自Gbico公司,胎牛血清购自杭州四季青公司。

1.3 心肌细胞原代培养[11]将乳鼠心脏剪成1 mm3左右小块,加0.125%的胰蛋白酶为单……