广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备

赵 芹，李华平，何自福，佘小曼，谢大森，何晓明，彭庆务

(1广东省农业科学院蔬菜研究所，广东广州510640;2华南农业大学植物病毒研究室，广东广州510642;3广东省农业科学院植物保护研究所，广东广州510640)

番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV)是世界番茄生产上主要病害之一.该病毒属双生病毒科Geminiviridae菜豆金色花叶病毒属Begomovirus，由烟粉虱 Bemisia tabaci以持久方式传播［1］.自从1964年发现 TYLCV以来，目前已在中东、东南亚、东亚及非洲等众多的国家和地区发现TYLCV［2］.近年来，在我国广东、广西、云南、浙江、江苏、河南及北京等部分番茄产区均严重流行，并造成了毁灭性危害，其为害症状主要表现为叶片卷曲、黄化、黄脉、叶脉增厚、叶背产生耳突及植株矮化，坐果少，果实变小，产量和商品价值均大幅下降，发病田块一般减产20% ～30%，严重的甚至绝收，给番茄生产造成严重损失［3-7］.

广东番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl Guangdong virus，TYLCGuV)属单组分菜豆金色花叶病毒属［3，8-9］，是从广东黄化曲叶的番茄病株分离鉴定的一个新种，含DNA-A组分，编码6个基因，同源比较发现AV1基因编码外壳蛋白，AV2基因编码病毒移动相关蛋白，AC1、AC2与AC3基因分别编码复制酶、转录增强子及复制增强蛋白，AC4基因鉴定为病毒转录基因沉默抑制子［3］，但基因编码的蛋白具体功能还需要进一步验证与分析.特异性抗血清的制备有助于对TYLCGuV目的蛋白的功能和性质进行体内外研究，但由于TYLCGuV仅分布于番茄病株的韧皮部，含量偏低，本研究将AC2基因构建至原核表达载体，诱导表达了TYLCGuV中AC2基因的融合蛋白，制备了高效价的……