脂多糖诱导小鼠内皮损伤早期T细胞亚群的变化①

郝 钰 赵 斌 郭钰琪 李 霞 王 丽 周宪宾 姚成芳

(山东省医学科学院基础医学研究所,济南 250062)

血管内皮是衬于血管腔面的单层扁平细胞,是血液和组织之间进行物质交换的选择性通透屏障,直接参与循环系统与其他功能器官之间的信息交流,也因此成为机体应对任何刺激时最直接、最敏感的“感受器”和“效应器”[1]。许多炎症因子能引起血管内皮细胞发生炎性反应,脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)为革兰阴性杆菌细胞壁的主要成分,是强有力的免疫炎症系统活化因子,可直接导致血管内皮细胞损伤[2,3]。内皮细胞损伤除了是心脑血管病、糖尿病等疾病发生发展的主要病理因素之外,也是炎症反应过程的早期事件。传统认为T细胞亚群是获得性免疫反应的主体细胞,主导后期免疫反应。以往有关内皮细胞的研究多集中在心脑血管病中内皮损伤的相关机制,涉及炎症反应早期内皮细胞损伤的相关研究也多围绕内皮粘附功能或巨噬细胞、粒细胞等炎性细胞的变化机制,没有炎症反应早期T细胞亚群的变化特点[4,5]。本研究采用LPS诱导小鼠血管内皮损伤后,检测T细胞亚群细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素 17(IL-17)及白细胞介素10(IL-10)分泌状态,探讨内皮损伤早期CD4+T细胞的反应状态。

1 材料与方法

1.1 动物 雄性C57BL/6小鼠,6～7周龄,购于山东大学实验动物中心,自由摄食饮水。

1.2 仪器与试剂 脂多糖(LPS,美国Sigma公司),RPMI1640培养基(Gibco公司),PMA(Phorbol myristate acetate)、离子霉素(Ionomycin)和莫能霉素(Monensin)均购自Sigma公司。FITC标记的CD4、CD62P抗体、PC5标记的CD3抗体和PE标记的CD62E、IFN-γ、IL-10、IL-17 和 TNF-α抗体均为美国 BD 公司产品。……