分时针刺胆经穴位对卵巢缺失大鼠TNF-β、IL-4以及T淋巴细胞亚群的影响①

陈 枫 袁婉丽 张岱权 王鸿度 陈 庄 唐小平 江 花 (泸州医学院附属医院,泸州 646000)

绝经期后妇女由于卵巢功能衰退,卵巢内分泌功能逐渐消失,从而诱发多种疾病并对某些疾病易感性发生变化,而现代医学主要采用对症及雌激素代替治疗为主。但雌激素疗法可能会增加乳腺癌、子宫内膜癌、冠心病、脑卒中的发病机率,其副反应大,禁忌症多[1]。近年学者转向寻找更安全有效的针灸治疗方案。为此,本实验以去卵巢大鼠作为实验动物模型,选取阳陵泉、环跳、悬钟、京门为主穴;观察不同时辰针刺血清中的TNF-β、IL-4及T细胞亚群的变化,试图从微观角度探求针灸对免疫功能的调节机制。

1 材料与方法

1.1 材料 SD雌性大鼠70只,体重250～300克,由泸州医学院实验动物科提供,一级动物。TNF-β、IL-4检测试剂盒,购自美国 RD公司;CD3-PCY5、CD4-FITC、CD8-PE单克隆荧光抗体、溶血素购自美国Beckman coulter公司,0.1 mol/L PBS液自配,流式细胞仪为Beckman Coulter型号Epics XL。

1.2 方法

1.2.1 实验动物及分组 无特定病原体12月龄雌性成年SD大鼠70只,随机分为7个组,正常对照组、假手术组、模型组、分时针刺胆经干预平旦组、日中组、日西组、夜半组,所有大鼠均以标准颗粒饲料、标准笼喂养。

1.2.2 造模方法 雌性成年SD大鼠,经适应性饲养2周后,各组大鼠腹腔注射1.5%戊巴比妥钠溶液麻醉,给药剂量为 0.3 ml/100 g。固定,剃毛。常规消毒。从背部正中切口,分层打开腹腔,切除双侧卵巢。然后在腹腔内注入甲硝唑注射液,分层关闭腹腔。假手术组操作步骤同上,但不切除卵巢,只切除卵巢附近的一小块脂肪组织后逐层缝合。……