发状念珠藻的分离纯化及人工培养条件研究*

苏振宏 王 芳 尹美珍

(黄石理工学院医学院，湖北黄石435003)

0 引言

发状念珠藻(Nostoc flagelliforme Born.et Flash.)是一种具有异型胞经济型固氮蓝藻，俗名头发菜、地毛、发菜等，分类系统中属于原核生物界(Procaryotae)，蓝藻门(Cyanophta)，蓝藻纲(Cyanophceae)，念珠藻属(Nostoc)。在我国主要分布于北部和西北部荒漠、半荒漠地区，能进行光合作用和固氮作用，是荒漠土壤中有机氮和碳的重要来源之一，具有重要的生态学作用。随着市场对发状念珠藻的需求逐渐增加，人们大面积的采集，乱拣乱搂，已造成该资源渐趋枯竭，导致草场退化和沙化，严重破坏了生态环境，影响了农牧民的正常生产和生活，在一些地方还影响到民族团结和社会稳定，如何解决这个难题是藻类学家的当务之急[1，8]。依据 2000 年《中华人民共和国野生植物保护条例》的有关规定，将发菜的保护级别由目前的二级调整为一级。长期以来人们一直试图采用人工培养的方法增加其生物量，以满足日益增长的市场需求，而目前发状念珠藻人工培养又尚未取得理想进展[2，8]。笔者从天然发状念珠藻原植体中分离纯化细胞，并对其液体悬浮培养生长特性进行了相关研究，旨在为解决野生发状念珠藻资源日趋减少而减轻采集野生发菜而产生的环境压力，为野生发状念珠藻大规模人工培养提供科学参考。

1 材料

1.1 试剂和仪器

植物光照生长箱、玻璃匀浆器、细菌过滤器、三角瓶、全自动高压灭菌锅、分光光度计、超净工作台、离心机。BG11培养基组成(1 000 mL)如表1所示(BG110就是 BG11培养基不加NaNO3)。……