福建闽侯福橘黑斑病病原菌的鉴定

兰成忠，李本金，李 炜，赵 健，陈庆河，翁启勇

福建省农业科学院植物保护研究所，福建福州 350013

柑橘黑斑病也称为黑星病，是柑橘的重要病害之一。此病也是我国出口预警重要病害及欧盟高度关注的检疫性病害，有该病症状的鲜果一旦被检出，将被禁止入境。以往柑橘黑斑病在我国柑橘产区零星发生，然而近年来逐渐加重并取代柑橘溃疡病，成为制约鲜果出口欧盟的重要病害(王卫芳等，2008;胡佳等，2010)。福建省也有相关报道，以前只在柑橘上发生，近几年在柚子果实上也发现了该病的危害。该病菌虽然不为害果肉，但会严重影响果实品质和销售价值(Wallingford，2005;林石明等，2010)。

国内研究表明，引起柑橘黑斑病病原菌的有性阶段为柑橘球座菌Guignardia citricarpaKiely，无性阶段为柑橘茎点霉Phoma citricarpaMcAlpine(蒲占湑和黄茜斌，2009;陈国庆等，2010，张玉洁等，2010)。但 Wulandariet al.(2009)研究认为，亚洲(包括泰国、印尼和中国)柚类Citrus maxima上发生的柑橘黑斑病病原菌为新种(亚洲种)Phyllosticta citriasianasp.nov。林石明等(2010)研究表明，引起福建省漳州琯溪蜜柚黑斑病的病原菌也为该新种P.citriasianasp.nov。但有关福建闽侯福橘黑斑病病原菌的种类尚未见报道。为此，笔者通过传统的病原形态学，结合rDNA-ITS序列的比对分析，对福建省福橘果实上的柑橘黑斑病病原菌进行鉴定，以期为更好地开展柑橘黑斑病的早期诊断和防治工作奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料来源

柑橘黑斑病病果(福橘)采集于福建省福州市闽侯县荆溪镇龙台山柑橘园，采回的病果装入保鲜袋并放于4℃冰箱内备用。

1.2 病原菌分离及单孢纯化

取病健交界处的组织，经75%乙醇表面消毒1 min，无菌水漂洗3次，待表面水分晾干后置PDA培养基平板上，于28℃黑暗条件下培养5 d。……