低氧诱导因子-1α在糖尿病肾病中的表达及其意义＊

赵辛元，李伟民，李彩蓉，余亚娟

(咸宁学院临床医学院内科学教研室，湖北 咸宁 437100)

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的最常见的微血管并发症，大量实验证实糖尿病肾病存在新生血管生成，而缺氧时微血管病变对肾脏疾病进展起着重要作用。低氧促进展的作用主要通过低氧诱导因子(HIF-1α)/低氧反应元件(HRE)途径［1］。持续稳定表达HIF-1α的基因敲除小鼠肾脏纤维化加重，提示HIF-1α是一个新的调节肾脏纤维化因子［2］。因此，研究DN大鼠肾脏中HIF-1α表达的变化，明确低氧与糖尿病微血管并发症的相关性，对有效防治和(或)延缓DN具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂

动物为清洁级近交系雄性Wister大鼠30只，体质量180～210g(由湖北省医学科学院实验动物中心提供);主要试剂为HIF-1α兔抗小鼠多克隆抗体(ZYMED LABORATORIES公司)。

1.2 糖尿病肾病大鼠模型的建立

清洁级近交系雄性Wister大鼠30只，每笼5只，饲养于标准环境，12h光照周期。随机分为糖尿病模型组和正常对照组，每组15只。糖尿病模型组给予单次左下腹腔注射60mg/kg的链尿佐菌素(STZ)，注射后第3d测尾静脉血糖，若血糖低于＜11.1mmol/L者被排除;正常对照组腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液，所有动物于8周处死。

1.3 标本采集

于实验第8周麻醉后剪断颈动脉取全血6～8ml，离心分离血清，待测各项指标。并处死动物，迅速取出肾脏，待检。处死前夜大鼠禁食过夜，自由饮水。

1.4 观察指标

①生化检测:BUN、Scr采用Beckmam全自动生化分析仪测定，并计算内生肌酐清除率;血糖测定采用美国罗氏公司血糖测定仪。②肾脏组织形态学观察:石蜡包埋肾组织切片行HE染色，在光镜下观察肾脏组织形态学改变。……