SB203580对受辐射小鼠免疫细胞的影响

李德冠，王月英，王小春，王 彦，路 璐，吴红英，张 恒，张俊伶，常建辉，翟志斌，孟爱民

(北京协和医学院 中国医学科学院 放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室，天津 300192)

免疫系统对辐射极为敏感，故免疫系统损伤在放射疾病、辐射事故以及临床放化疗时会受到不同程度的损伤，机体免疫功能下降，造成免疫力低下，引起继发感染等。研究发现，p38 MAPK在辐射引起的细胞损伤过程中起一定的作用，抑制该通路可缓解细胞内活性氧(ROS)引起的造血干细胞衰竭［1-3］。

SB203580是广泛应用的p38 MAPK通路抑制剂，能降低细胞中p38表达水平，有效抑制p38 MAPK通路［4-5］。本实验中我们给予受照射小鼠腹腔注射p38抑制剂SB203580，观察抑制p38通路对辐射免疫损伤的影响，探讨其作为辐射防护药物的可能性。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

SB203580(美国 LB laboratory);RPMI 1640培养基、小牛血清(美国Gibco公司);倒置显微镜(日本Olympus);流式细胞仪Coulter Altra(美国Beckman);全自动血液分析仪poch-100i(日本sysmex);infinite200多功能酶标仪(瑞士 Tecan);137Cs γ射线照射源USD，Autocell 40(加拿大原子能有限公司)，剂量率0.80 Gy/min。

1.2 动物

C57BL/6纯系小鼠，雄性，体重20～22 g，购自北京维通利华实验动物中心，合格证号:SCXK(京)2008-0003。

1.3 实验方法

1.3.1 分组及给药 将C57BL/6小鼠30只，分为对照组、照射组和SB组，每组10只。对照组接受假照射，其余2组进行2Gy剂量的γ射线照射。SB组于照射后24 h开始给药，给药剂量为15 mg/kg，腹腔给药，隔日1次，共5次，对照组、照射对照组于相同时间皮下注入等量二甲亚砜(DMSO);末次给药24 h后处死小鼠，取外周血进行分型 CD4、CD8、B220检测，取骨髓细胞测定ROS。

1.3.2 白细胞计数及分类 外周血取后用K3EDTA抗凝，用血细胞计数仪检测。……