蒺藜不同产地化学成分HPLC－模糊聚类分析

张素军

（临沂大学 生命科学学院，山东 临沂 276000）

蒺藜（Tribulus terrestris L.）为蒺藜科 （Zygophyllaceae）一年生草本植物，分布于全国各地，其果实具有平肝解郁、活血祛风、明目止痒等功效［1］。作为传统中药，蒺藜有着悠久的临床应用历史，并且全国通用。我国地域广袤，地理环境和气候条件相差很大，不同产地的蒺藜在发挥药效的物质基础上是否具有地域差异性以及道地性，这方面的研究将为蒺藜资源的合理利用和临床用药提供理论指导。本文应用中药指纹图谱技术中的高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）指纹图谱，对不同产地蒺藜的化学成分进行模糊聚类，以比较不同产地蒺藜在药效物质基础上的差异程度。

1 实验材料

蒺藜果实2009年8月中旬分别采自山东、河北、新疆、黑龙江、云南和福建，分别以SD、HB、XJ、HLJ、YN、FJ表示，经临沂大学生命科学学院副教授王文房鉴定，均为Tribulus terrestris L.的果实。取此果实，75%乙醇消毒3min、蒸馏水充分冲洗后，于55℃烘箱中烘干，机械粉碎后过45目筛，置干燥器内备用。所用试剂除特别说明外均为分析纯，水为双蒸水。

2 方法与结果

2.1 样品溶液的制备

分别精密称取蒺藜果实粉末5.0g，置具塞三角瓶中，加蒸馏水50mL，称重，室温放置30min后，100℃水浴中提取60min，称重，用蒸馏水补足减失重量，过滤，4000r·min－1离心10min，上清用0.4μm微孔滤膜滤过，即得。

2.2 色谱条件

KR 006C18色谱柱（250mm ×4.6mm ，5μm）；甲醇（A）－0.1%醋酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱如表1所示；柱温为 30℃；流速为0.5mL·min－1；检测波长为254nm；进样体积为10μL。所得色谱图以山东样品为例，见图1。6个样品的色谱峰以相对保留值进行排列。

2.3 方法学考察

2.3.1 精密度试验

按“2.1”项下制备山东样品溶液，连续进样5次，各共有色谱峰的相对峰面积的RSD均小于3%，表明本方法具有较高的精密度。……