川陈皮素的体外抑癌活性及其机制研究

苏明媛， 牛江龙， 李 林， 袁才根， 卢艳花*

(1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海，200237;2.联合利华中国研究所，联合利华研发中心(上海)，上海，200335)

川陈皮素(Nobiletin，5，6，7，8，3，4-hexamethoxy flavone)是从芸香科柑桔属橘子 Citrus reticulaia Blanco果皮中提取的一种黄酮化合物，按结构分类，它是一种多甲氧基黄酮类物质［1］。目前已经证实川陈皮素具有抗氧化［2-3］、抗炎［3］、抗肿瘤［2-4］、抗病毒［5］等多种生物活性，因此它的开发利用越来越受到人们的关注。本实验旨在研究川陈皮素对多种肿瘤细胞生长的抑制作用及其可能的作用机制，以进一步揭示川陈皮素在抗肿瘤方面的活性及分子作用机制。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 96孔细胞培养板、6孔细胞培养板购自 Corning公司;流式细胞仪购自 Becton Dickinson公司;MK3酶标仪购自Thermo Labsystem公司;荧光显微镜购自德国徕卡仪器有限公司。

RPMI-1640培养基、DMEM培养基购自 Gibco公司;小牛血清购自杭州四季青公司;Caspase-3分光光度法检测试剂盒购于南京凯基生物公司;AV/PI双染试剂盒购自Mbchemic生物公司;MTT、罗丹明123、DCFH-DA、Hochest33258均为 sigma公司产品;川陈皮素，纯度＞98%，购自南京泽朗医药科技有限公司。阳性药物阿霉素(Adriamycin，ADM)购自浙江海正药业有限公司。其余试剂均为AR级。

1.2 细胞株及培养条件 Caco-2(人结肠癌细胞)、HeLa(人宫颈癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、A375(人黑色素瘤细胞)，培养基为高糖的DMEM，添加10%小牛血清;SW1990(人胰腺癌细胞)，培养基为RPMI-1640培养基，添加10%小牛血清。细胞置5%CO2培养箱，37℃，饱和湿度下培养，隔天换液1次。所有细胞均购自上海中科院细胞库。

1.3 药物配制 称取16.1 mg川陈皮素，用1 mL的DMSO(二甲基亚砜)溶解，配制成40 mmol/L的贮备溶液。……