张 娅,李宝才,项朋志,高云涛
(1.昆明理工大学生命科学与技术学院,云南 昆明 650093;2.云南省中医中药研究院,云南 昆明 650223;3.云南国防工业职业技术学院,云南 昆明 650223;4.国家民委-教育部共建民族药资源化学重点实验室,云南 昆明 650500)
松茸(Tricholomamatsutake)在真菌分类上属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、蘑菇科、蘑菇属,原产于巴西,又名“巴西蘑菇”[1]。多糖是松茸的重要活性成分[2~4],大量药理及临床研究证实,多糖有调节免疫、抗癌、抗肥胖、控制血糖、降胆固醇、降血脂等生理功能,作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景[5]。研究表明,松茸多糖的抗肿瘤活性远远高于灵芝,在被研究的15种具有抗癌活性的食用菌中位居首位[6]。
作者采用超声波辅助水提[7]、分级醇沉纯化[8]的方法制得松茸多糖,对松茸多糖抗氧化活性进行测定并与茶多酚进行比较,拟为松茸的开发利用提供科学依据。
松茸为鲜品,采自云南丽江。
核黄素(VB2)、氯化硝基四氮唑兰(NBT),ChemBase公司;番红花红(Safranine T),蛋氨酸,2-硫代巴比妥酸(TBA),三氯乙酸(TCA),苯酚,葡萄糖,磷酸盐(PBS)缓冲溶液,茶多酚(97%)。所用试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。
7200型可见分光光度计,尤尼柯上海仪器有限公司;AS3120A型超声波清洗器,天津奥特赛恩斯仪器有限公司;旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;植物粉碎机;光照箱(35 cm×30 cm×25 cm,光源为纯稀土节能灯,灯功率2×18 W),自制。
采用超声波辅助水提、分级醇沉纯化的方法提取松茸多糖,流程如下:
松茸洗净→称重→粉碎→超声提取→抽滤除渣→减压浓缩→乙醇沉淀→真空干燥→粗多糖→复溶→脱蛋白→离心分离→乙醇沉淀→真空干燥→精制多糖……p>