如何利用凯氏定氮仪测牛奶中蛋白质含量

王 蕾 许小友 孙 梅 高领

1.河南省驻马店市畜牧局,河南 驻马店 463000;2.河南省汝南园林学校,河南 汝南 463300

蛋白质在人体的生化代谢和结构组成中起着十分重要的作用,而牛奶以其氨基酸组成合理、蛋白质易吸收利用等优点成为人体蛋白质的最佳来源。凯氏定氮法因其准确度和精密度高,仍是目前测定牛奶中蛋白质含量的首选,但操作过程繁琐、效率低。笔者认为在工作实践中应基于凯氏定氮法的检测原理,利用凯氏定氮仪测定牛奶中蛋白质的含量,不仅不会降低准确度而且能提高工作效率,以便更好地监督动物产品质量。

1 试 剂

1)混合催化剂:无水硫酸铜和硫酸钾分别研碎,按1∶10的比例混合均匀。

2)密度为1.84 g/L的硫酸,2%硼酸溶液,40%氢氧化钠溶液,30%双氧水,0.1 mol/L盐酸标准溶液。

3)混合指示剂:0.1%甲基红乙醇溶液和0.5%溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合,置阴凉处,有效期3个月。

2 仪器设备

感量为0.1 mg的分析天平,25 m L的滴定管,半自动或全自动凯氏定氮仪。

3 分析步骤

1)试样消煮。精密称取混合均匀的牛奶样品5.0 g(约 25.0 mg氮,称样量不能太大,否则易起大量泡沫),精确至0.1 mg;小心放入消煮管,避免试样附着在管壁;加入混合催化剂5.0 g,与试样混合均匀;再加入12 m L硫酸和2～5 mL的双氧水(因牛奶脂肪含量高,在消煮前期极易起泡沫且泡沫不易消失,泡沫易粘附于管壁而影响结果的准确性;加入双氧水起消泡作用,且易使溶液澄清透明,可缩短消煮时间);420℃加热至液体呈透亮的蓝绿色后,继续加热至少1 h;消煮好后关闭热源让其自然降温。……