丹红通精方对自身免疫性慢性前列腺炎大鼠血液及前列腺组织细胞因子水平的影响

黄志洪 ，卢玉忠，李慎果，覃 湛，张兆磊，袁少英*

1.广州中医药大学附属广东省中医院珠海医院药剂科，广东珠海 519015；2.广州中医药大学，广东广州 510405；3.广州中医药大学附属广东省中医院珠海医院男科，广东珠海 519015

近年来，慢性前列腺炎发病率有增高的趋势，中青年男性发病率高，且缺乏有效的治疗方法和药物。我院男科根据多年临床与实验研究总结出治疗慢性前列腺炎的系列中药方剂，其中丹红通精方对气滞血瘀型前列腺炎疗效明显[1]，为寻找其治疗作用的机理，笔者通过丹红通精方对自身免疫性慢性前列腺炎大鼠血液及前列腺组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素 10（IL-10）水平影响的实验研究来探讨。现报道如下：

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性 Wistar大鼠，8～10 周龄，体重 250～300 g，清洁级。

1.2 主要试剂

福氏完全佐剂（FCA）；卡介苗；百白破疫苗；0.5%TritonX 2100（内皮细胞损伤剂）的生理盐水（自配）；0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS缓冲液）；乙醚；酶联接免疫吸附剂测定（ELISA）试剂盒（北京晶美生物工程有限公司）；RNA抽提剂（Trizol）（美国Invitrogen公司）；氯仿和异丙醇；实时定量PCR扩增仪（Roche公司）；内参照TNF-α、IL-10的阳性模板标准品（上海博亚生物公司）；内参照TNF-α、IL-10的特异性引物（上海生物工程技术公司）；荧光染料SYBR GreenⅠ（Bio-Rad公司）；RNA 提取试剂盒（QIAGEN 公司）；RNA 逆转录试剂盒（Invitrogen公司）；DNA聚合酶（大连宝生物工程公司）。

1.3 大鼠前列腺蛋白提纯液的制作

取雄性Wistar大鼠10只，处死后再剥取其前列腺组织，加入含0.5%Triton X 2100（内皮细胞损伤剂）的生理盐水溶液，匀浆离心后，取上清液，用721分光光度计，以牛血清白蛋白溶液为标准蛋白，采用双缩脲法进行蛋白含量测定，最后用0.1 mol/L PBS缓冲液稀释为15 mg/ml浓度的溶液。……