脑创伤模型创伤区脑组织中miRNA-21的表达变化及意义

(天津医科大学总医院，天津 300052)

近年发现，miRNA 可同时封闭多个靶基因的翻译，干预调节miRNA可改变多个靶基因的表达水平，可大大提高颅脑损伤的干预效率［1］。目前，关于miRNA在脑创伤组织中的表达报道鲜见。在我们的前期研究中，采用miRNA芯片研究脑创伤大鼠模型皮层中miRNA表达变化，得到在脑创伤后14 d内的创伤皮层miRNA动态表达谱［2］。通过生物信息学分析及数据库文献检索，确定miRNA-21可能为脑创伤后修复性基因［3］。2010年1～12月，我们对脑外伤大鼠模型检测其创伤区脑组织中miRNA-21，并分析其与大鼠神经行为学评分和凋亡神经细胞的关系，为脑创伤后神经修复治疗提供新思路。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 成年雄性Wistar大鼠196只，体质量250～300 g，随机分为假手术对照组(对照组)和创伤组，各98只。创伤组以液压打击法［4］制作大鼠脑外伤模型;对照组仅行头皮切开和磨除骨窗，保持硬膜完整，不进行打击。头皮切口均消毒缝合。两组分笼喂养，昼夜交替光照12 h，饲养环境温度为(22±2)℃，相对湿度为20%～50%。

1.2 观察指标及方法

1.2.1 大鼠的神经行为学评分 分别在创伤后2、12、24、48、72 h 和 7、14 d，采用神经行为学评分标准［5］，共5项(平衡能力、生理反射检测、提尾反射、运动评估、感觉功能)，0分为正常，1～6分为轻型损伤，7～12分为中型损伤，13～18分为重型损伤。

1.2.2 脑组织中miRNA-21检测及凋亡细胞计数神经行为学评分后分别于上述时点处死大鼠，每次14只。处死后立即断头取脑组织，选取创伤灶边缘水肿区皮层组织，显微镜下清除软膜及血管，生理盐水漂洗，装入冻存管置液氮速冻后转至－80℃冰箱保存待用。……