刘满华 田 蕾 郭连怡 李 舒 (辽宁医学院附属第一医院消化内科,辽宁 锦州 121000)
凋亡是肿瘤发生的重要机制,凋亡通路的紊乱、促进凋亡因子的抑制、凋亡抑制因子的过表达以及凋亡基因的表达失控,都会导致肿瘤的发生、发展。Livin是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族(IAPs)中的新成员,特异高表达于多种实体肿瘤组织和肿瘤细胞系,能抑制许多凋亡刺激诱发的细胞凋亡〔1〕。Caspase-9是一种促凋亡因子,属于凋亡蛋白家族,是Caspase系统引起细胞凋亡的最关键成分之一。为探讨两者对胃癌发生发展的影响,本实验应用免疫组织化学方法检测胃癌中Livin基因的表达及其与Caspase-9的关系,旨在探讨二者在胃癌发生发展过程中的作用,从而为胃癌的诊断与临床治疗提供参考和依据。
1.1 标本来源 收集辽宁医学院附属第一医院2010年1月至2010年10月胃癌手术切除标本78例,其中男48例、女30例,年龄42~76岁,中位年龄64岁。所有患者均经术中快速冷冻切片和常规病理诊断确诊,术前均未接受化疗、放疗或免疫治疗。按照国际抗癌联盟(UICC)TNM分期:Ⅰ期14例,Ⅱ期28例,Ⅲ期36例,无Ⅳ期病例。组织学分级高分化3例,中分化22例,低分化33例,未分化20例。其中伴有淋巴结转移者49例,无淋巴结转移者29例。随机选取30例胃溃疡患者胃黏膜组织作为对照。
1.2 试剂 Livin兔抗人多克隆抗体(稀释浓度1∶200)、Caspase-9兔抗人多克隆抗体(稀释浓度1∶100)为武汉博士得生物工程有限公司产品,PV-6000免疫组化试剂盒和DAB显色剂购自北京中杉金桥技术有限公司。
1.3 方法 采用免疫组织化学PV-6000两步法。……