复方首乌软胶囊对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠p16基因表达的影响*

姚 毅，谭喜莹，王淑云，朱萱萱

江苏省中医院，南京 210029

复方首乌软胶囊是江苏省中医院传统中药制剂，主要由赤白首乌、地黄、牛膝、桑椹、女贞子、墨旱莲、桑叶、菟丝子、金樱子、黑芝麻、金银花等14味中药组成，具有补肝肾、强筋骨、乌须发的功效。临床实践表明，复方首乌软胶囊具有良好的抗衰老作用。药理实验证明，复方首乌软胶囊具有降低机体耗氧量,增加供氧量的作用，可明显延长小鼠游泳时间[1]。复方首乌软胶囊还可以增强机体内源性抗衰老物质SOD活性，从而抑制自由基对细胞的损害[2]。近年来的研究表明，基因是主导生物衰老过程的主要原因，衰老过程中多数原癌基因的表达或产物活性降低，抑癌基因则相反。p16基因是一种主要抑癌基因，p16的积累是衰老的诱因。抑制p16的表达，虽然不激活端粒酶，但是能减慢端粒的缩短，并增强DNA损伤修复能力，从而延缓了衰老的进程[3]。本实验采用D-半乳糖诱发的亚急性衰老模型，采用荧光定量PCR（Realtime-PCR）法检测小鼠脑中p16基因的表达，探讨复方首乌软胶囊对衰老基因p16表达的影响，进一步阐明复方首乌软胶囊抗衰老作用的生物学基础。

1 材 料

1.1 药品

复方首乌软胶囊（江苏省中医院制剂部）；活力苏口服液（主要成分:制何首乌、淫羊藿、黄精、枸杞、黄芪、丹参；成都地奥集团天府药业股份有限公司，批号:100202）；D-半乳糖（美国 Sigma公司，批号:G-0625）；Trizol试剂 （Invitrogen公司）；AMV反转录试剂盒（Promega公司）；Realtime-PCR引物由南京金思瑞生物公司合成；SYBR Green I核苷酸胶体染料（Invitrogen 公司）；Taq PCR Master Mix Kit（Qiagen公司）。

1.2 动物

ICR小鼠，由扬州大学提供，合格证号:苏SCXK（苏）2007-0001。……