咪达唑仑对新生大鼠离体脊髓运动神经元的作用

宦才娟，汪萌芽

(皖南医学院 细胞电生理研究室，安徽 芜湖 241002)

咪达唑仑(Midazolam)是当前临床使用的唯一水溶性苯二氮艹卓(BZ)类药，依剂量的不同而具有镇静、催眠、抗焦虑、抗惊厥、抗癫痫及中枢肌松等作用［1］。咪达唑仑具有起效快、苏醒快，对呼吸和循环功能干扰少，安全有效等特点，是较理想的静脉麻醉药，有广泛的应用前景［2］。尽管临床观察发现静脉注射咪达唑仑显示镇痛作用［3］，但有关咪达唑仑镇痛作用中是否涉及对脊髓运动神经元(motoneuron，MN)的影响，目前国内外尚未见研究报道。本文应用细胞内记录技术，观察咪达唑仑对新生大鼠脊髓切片MN的作用。

1 材料与方法

1.1 新生大鼠脊髓切片的制备 取8～14 d龄新生SD大鼠(雌雄不拘，由南京青龙山动物养殖场提供)，参照报道方法［4］，经乙醚麻醉后行椎板切除术，分离出含腰骶膨大的脊髓节段后，将脊髓用胶水(crazy glue)固定在琼脂块上，再将琼脂块固定于振荡切片机(Vibratome)的冰浴载物浴碟内，用剃须刀片横向切取厚度为400～500 μm的脊髓切片若干，在室温下置于用混合气体(95%O2+5%CO2)饱和的人工脑脊液(ACSF)中孵育、备用。在制备脊髓切片过程中，用0～4℃并经混合气体饱和的ACSF浸浴离体的脊髓节段，整个过程控制在15 min以内。ACSF 的成分为(mmol/L):NaCl 127.0，KCl 1.9，KH2PO41.2，CaCl22.4，MgSO4·7H2O 1.3，NaHCO326.0，Glucose·H2O 10.0，pH 7.4。

1.2 新生大鼠脊髓MN的细胞内记录 新生大鼠脊髓切片于室温下孵育40～60 min后，用吸管移入自制的全浸式记录浴槽，用上、下两个丝网相夹固定，持续灌流经混合气体饱和的ACSF，浴槽中灌流液的温度为室温(22～25℃)。用P-97程控微电极拉制仪(Sutter Instrument Co.，USA)拉制含纤维玻璃微电极，内充3 mol/L乙酸钾，固定于微操纵仪(MP-1，Narishige，Japan)上，将探头(headstage)上的银丝插入电极尾端内，用于胞内电流注入及电位记录。……